[发明专利]一种姜黄素长循环脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种姜黄素长循环脂质体的制备方法。 

背景技术

姜黄素（Curcumin, Cur）是中药姜黄的主要活性成分，属于多酚类化合物，现代研究已经明确证明其具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种药理作用，且毒副作用小，临床应用前景良好。但由于姜黄素水溶性差，易被氧化，体内代谢迅速，生物利用度低的缺陷限制了姜黄素的推广发展。脂质体（Liposomes）作为药物新型给药系统具有靶向性，缓释性，降低药物毒性和提高药物稳定性的优点。但是作为药物载体普通脂质体作用时间仍然不理想，且长期储存易聚集稳定性欠佳。 

发明内容

为了提高姜黄素稳定性降低其在血浆内的消除速率，本发明提供了一种姜黄素长循环脂质体的制备方法。 

本发明采用的技术方案是：一种姜黄素长循环脂质体的制备方法，所述方法包括：称取质量之比为1﹕30~50﹕3~5﹕1~3的姜黄素、大豆卵磷脂、胆固醇和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，溶于乙醇中作为有机相；以pH6~7的磷酸盐缓冲盐液作为水相；在1000~1500 r·min^-1的转速下，将有机相匀速缓慢滴入40~50℃保温的水相中，滴毕，继续搅拌2~3h，挥发有机溶剂，得到所述姜黄素长循环脂质体的溶液。 

本发明采用聚乙二醇（PEG）修饰的长循环脂质体，能够提高脂质体的亲水性，减弱血浆蛋白的调理作用，逃避网状内皮系统对其的识别，降低与单核吞噬细胞的亲和力，可在循环系统中稳定存在并使半衰期延长，增加肿瘤组织对它的摄取。 

优选的，所得姜黄素长循环脂质体的溶液进一步在-80℃预冻10h后真空冷冻干燥，得姜黄素长循环脂质体冻干粉，冷冻保存备用。 

优选的，所述姜黄素、大豆卵磷脂、胆固醇和聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺质量用量之比为3﹕100﹕10﹕5，有机相中姜黄素浓度为1.5mg/mL。 

本发明的有益效果主要体现在：本发明以乙醇注入法制备Cur-LCL，工艺简单，包封率较高，粒径较小，体外释放缓慢，体内药动学数据显示其血浆清除率明显降低，半衰期显著延长，有一定长循环作用。 

附图说明

图1为Cur-LCL的透射电镜照片（×60000）。 

图2为Cur-LCL的粒径分布。 

图3为Cur-LCL 的Zeta电位分布。 

图4为Cur原药、 Cur脂质体、 Cur长循环脂质体的体外释药曲线（n=3）。 

图5为空白大鼠血浆（A）、空白大鼠血浆加Cur内标物（B）、尾静脉给药Cur-LCL后大鼠血浆样品加内标后（C）的高效液相色谱图。 

图6为大鼠尾静脉给药Cur原药、Cur脂质体混悬液、Cur长循环脂质体混悬液后的药时曲线。 

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此： 

实施例1：

1.     仪器与材料

1.1.    仪器

CP225D电子天平（德国赛多利斯公司）；UV-1700紫外分光光度计（日本岛津公司）；Agilent 1200高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；HJ-6B多头磁力加热搅拌机（金坛市金伟实验仪器厂）；SCIENTZ-ⅡD超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；pH酸度计（瑞士梅特勒托利多）；Optima超速低温离心机（美国Beckman公司）；Labconco冷冻干燥机（美国Labconco公司），Marvern measurement粒度测定仪（英国马尔文仪器有限公司），JEM-1200EX透射电子显微镜（日本JEOL公司）。

药品与试剂 

姜黄素（成都普思生物技术有限公司，含量>98%，批号12041502）；姜黄素对照品（中国食品药品检定研究院，含量98.8%，批号110823-201004）；注射用大豆卵磷脂（PC>95%， 购自上海太伟药业）；胆固醇（美国Avanti Polar Lipids， 纯度>99%）；聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（PEG-DSPE，美国Avanti Polar Lipids，纯度>99%）；甲醇（色谱纯，美国Honeywell Burdick&Jackson公司，批号10071753）；其他试剂均为国产分析纯。

实验动物