[发明专利]大鲵黏液蛋白、制备方法及在化妆品中的应用

权利要求书

1.一种大鲵黏液蛋白，其特征在于分子量为17 000道尔顿，含两个亚基8500道尔顿，所述亚基含有77个氨基酸残基；N末端为：缬氨酸-甘氨酸-酪氨酸-苏氨酸-缬氨酸-甘氨酸-丙氨酸-苏氨酸-脯氨酸-甲硫氨酸-。

2.根据权利要求1所述的大鲵黏液蛋白，其特征在于：所述大鲵黏液蛋白的氨基酸含量（摩尔/100摩尔）为：天冬氨酸和天冬酰胺4.76%， 苏氨酸7.05%，丝氨酸5.62%，谷氨酰胺和谷氨酸5.25%，脯氨酸9.02%，甘氨酸17.88%，丙氨酸4.83%，缬氨酸7.16%, 异亮氨酸7.14%, 亮氨酸 8.25%，酪氨酸5.26%, 苯丙氨酸 5.27% 组氨酸 1.79%， 精氨酸 2.07%，甲硫氨酸1.,32%，赖氨酸7.22%。

3.一种如权利要求1或2所述大鲵黏液蛋白的制备方法，其特征在于依次

按如下步骤进行：

a. 收集大鲵黏液，将大鲵黏液在0~10℃时进行匀浆，向匀浆中加入1~3倍体积pH 7~8含有0.15 M NaCl的0.01~0.1M Tris-HCl缓冲液，置于4℃过夜，5000g离心20 min，收集上清；

b. 向所收集上清中加入(NH₄)₂SO₄至80%饱和浓度，静置过夜后，5000g离心20 min，收集沉淀，透析、冻干，得大鲵黏液冻干粉；

c. 用pH 6-9、0.01-0.1 M Tris-HCl缓冲液溶解大鲵黏液冻干粉，加入到交联的卵黏白蛋白-猪胃黏蛋白亲和层析上，先用pH 6-9、0.01-0.1 M Tris-HCl缓冲液清洗，再用1.5 M NaCl溶液洗脱，收集NaCl洗脱液，透析冻干；

将冻干粉溶于pH 6-9、0.01-0.1 M Tris-HCl冲液中，再加到分子筛层析Sephadex G-100  上，收集具有OD₂₈₀吸收的层析峰，得大鲵黏液蛋白。

4.一种大鲵黏液蛋白在化妆品中的应用。

5.根据权利要求4所述大鲵黏液蛋白在制备化妆品中的应用，其特征在于在改善皮肤毛细管血管扩张症化妆品中的应用。