[发明专利]一种对参麦注射液中麦冬皂苷D′含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉中药有效成分测定方法，尤其是参麦注射液中麦冬皂苷D′含量的测定方法。

背景技术

麦冬具有滋阴生津，润肺清心等功效，是临床治疗心血管疾病的重要组成药味。其主要成分为甾体皂苷、多糖和高异黄酮类化合物。麦冬总皂苷主要含麦冬皂苷A、B、C、D及麦冬皂甙B′、C′、D′，其中麦冬皂苷A、B、C、D苷元为鲁斯考皂苷元，麦冬皂甙B′、C′、D′苷元为薯蓣皂苷元。药理研究表明:麦冬总皂苷具有抗心肌缺血损伤和抗心率失常作用。在川麦冬中总皂苷主要含麦冬皂苷D和D′。

罗晓玲，邵青，瞿海斌等报道“HPLC—ELSD法测定参麦注射液中薯蓣皂苷元”，参麦注射液样品中薯蓣皂苷元含量较低，约为4μg/mL；测定的苷元，无法判断为那种皂苷的水解产物；且样品处理繁琐。

固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取作为样品前处理技术，在实验室中得到了越来越广泛的应用。

麦冬，作为参麦注射液主要药味之一，如何使麦冬中更多的活性成分在参麦注射液中得以体现，并能进行测定控制，进一步提高参麦注射液的有效性、可控性，是很多药学工作者一直希望解决的事。发明人通过研究发现，对参麦注射液进行有机溶剂萃取、固相萃取后，能够测定参麦注射液中的主要活性成分麦冬皂苷D′。

参麦注射液现行版标准为WS₃-B-3428-98-2010，在标准中采用麦冬照药材薄层色谱法对麦冬中水解产物—苷元进行控制，和HPLC-ELSD法对麦冬中糖类成分进行控制。麦冬含有甾体皂苷、多糖和高异黄酮类等多种化合物,麦冬皂苷具有抗心肌缺血损伤和抗心率失常等作用，而麦冬单体皂苷在参麦注射液中的控制尚未见报道。正是因为麦冬皂苷D′的好处很多，在医疗健康领域中广泛应用，因此如何对参麦注射液中麦冬皂苷D′的含量准确测定是十分关键且意义重大的。另外，目前各大医院在对患者使用参麦注射液治疗时，主治医师都不是很清楚所使用的参麦注射液中麦冬皂苷D′的准确含量，只能根据个人经验来增减参麦注射液的使用瓶数来调整治疗的进度，这对患者而言，心里就没有个低，不知道自己经过治疗到底是康复了多少，而且医生本人也不清楚到底用了多少量的麦冬皂苷D′，这就不能形成一个非常客观、精确的数据来对治疗过程进行严格的评估。因此，发明人人经过长时间的潜心研究，终于找到一种对参麦注射液中麦冬皂苷D′的含量准确测定的方法，该方法填补了对参麦注射液中麦冬皂苷D′控制的空白，克服了上述的种种缺陷和不足。

发明内容

本发明的目的正是为了克服现有参麦注射液中麦冬皂苷D′的准确含量无法控制的缺陷而提供一种参麦注射液中麦冬皂苷D′含量的测定方法，本该方法弥补了国内没有对参麦注射液中麦冬皂苷D′的含量准确测定的空白，且本发明技术方案的准备工作简单、使用设备较少、成本低廉，且测定结果准确性高、精密度强。

本发明采用如下技术方案实现。

一种对参麦注射液中麦冬皂苷D′含量的测定方法，包含供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、高效液相检测；对照品溶液为含麦冬皂苷D′0.2mg/ml的甲醇溶液，高效液相检测条件为反相色谱柱，蒸发光散射检测器，流动相为水-乙腈为48：52，其特征在于，其中供试品溶液的制备方法为：

将待测定的参麦注射液置于分液漏斗中，加水饱和正丁醇萃取，合并正丁醇液并用氨试液洗涤，正丁醇部分蒸干，残渣加水溶解，上处理好的ODS小柱，控制上样和洗脱过程流速不大于1.0ml/分钟，先用水冲洗，再用浓度为10-55%的有机溶剂水溶液冲洗，最后用浓度为63-68%有机溶剂水溶液冲洗，收集该有机溶剂水溶液，水浴蒸干，残渣溶解，即能够测定参麦注射液中麦冬皂苷D′含量。

本发明所采用的供试品溶液的测定方法为：精密量取适量待测定的参麦注射液置于分液漏斗中，加水饱和正丁醇萃取3-5次，每次加参麦注射液体积的1-3倍的水饱和正丁醇萃取，合并正丁醇液，再用正丁醇体积的0.5-1.5倍氨试液洗涤1-3次，正丁醇部分蒸干，残渣加水溶解，上处理好的ODS小柱，控制上样和洗脱过程流速不大于1.0ml/分钟，先用10-30ml水冲洗，再用浓度为45-55%的甲醇、乙腈或乙醇水溶液15-25ml冲洗，最后用浓度为63-68%甲醇、乙腈或乙醇水溶液40-20ml冲洗，收集该甲醇、乙腈或乙醇水溶液，水浴蒸干，残渣用水、甲醇、乙腈或乙醇转移至容量瓶，定容至每ml含麦冬生药0.1-3g，摇匀即得。