[发明专利]两种scFv抗体、其编码基因及其在制备治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及两种scFv抗体、其编码基因及其在制备治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用。

背景技术

鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease，IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus，IBDV）引起的一种急性、高度接触性鸡传染病，具有传播速度快、传染性强、感染率及死亡率均高的特点。该病给养禽业造成重大经济损失。

IBDV可在雏鸡法氏囊中的淋巴细胞，尤其是B淋巴细胞中迅速繁殖，促使B淋巴细胞凋亡，法氏囊极度萎缩，最终导致免疫缺陷和免疫抑制。因此极易造成细菌（大肠杆菌和沙门氏菌）的继发感染，同时可还造成其他疫苗的免疫失败。多克隆抗体（高免血清和卵黄抗体）是目前有效的治疗手段，在发病早期治疗效果良好，但是由于工业化生产可控性差和存在水平传播疾病（鸡白痢、霉形体、减蛋综合症和禽白血病）以及由一些非特异性抗体引起的过敏性反应等原因而受到限制。

基因工程抗体即将抗体的基因按不同需要进行加工、改造和重新装配，然后导入适当的受体细胞中进行表达的抗体分子。在原核细胞中表达基因工程抗体目前技术已经相对成熟，可实现工业化的生产，产品质量可控均一。同时原核表达系统不存在水平传播传染性疾病的危险。

发明内容

本发明的目的是提供两种单链抗体（scFv抗体）、其编码基因及其在制备治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用。

本发明提供了两种单链抗体，命名为IBDV-VP2 scFv29抗体和IBDV-VP2 scFv30抗体，包括由重链可变区、轻链可变区以及它们之间的连接区组成；

所述IBDV-VP2 scFv29抗体的重链可变区为如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列1自N末端第1-129位氨基酸残基组成的蛋白质；（b）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质；

所述IBDV-VP2 scFv29抗体轻链可变区为如下（c）或（d）：（c）由序列表中序列1自N末端第145-250位氨基酸残基组成的蛋白质；（d）将（c）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质。

所述单链抗体IBDV-VP2 scFv29具体可为如下（e）或（f）：（e）由序列表中序列1所示的蛋白质；（f）将（e）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质。

编码所述单链抗体IBDV-VP2 scFv29的基因也属于本发明的保护范围。

所述单链抗体IBDV-VP2 scFv29基因中，编码所述重链可变区的DNA分子为如下（1）或（2）或（3）：（1）序列表的序列2自5’末端第1-387位核苷酸所示的DNA分子；（2）在严格条件下与（1）限定的DNA序列杂交且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子；（3）与（1）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子。

所述单链抗体IBDV-VP2 scFv29基因中，编码所述轻链可变区的DNA分子为如下（4）或（5）或（6）：（4）序列表的序列2自5’末端第433-753位核苷酸所示的DNA分子；（5）在严格条件下与（4）限定的DNA序列杂交且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子；（6）与（4）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子。

所述单链抗体IBDV-VP2 scFv29基因具体可为如下（7）或（8）或（9）或（10）：（7）序列表的序列2自5’末端第1-753位核苷酸所示的DNA分子；（8）序列表的序列2所示的DNA分子；（9）在严格条件下与（7）或（8）限定的DNA序列杂交且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子；（10）与（7）或（8）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有相同活性的蛋白的DNA分子。

所述IBDV-VP2 scFv30抗体的重链可变区为如下（a’）或（b’）：（a’）由序列表中序列3自N末端第1-135位氨基酸残基组成的蛋白质；（b’）将（a’）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白质；