[发明专利]一种基于腺病毒AdC68的表达载体及其构建方法在审
| 申请号： | 201310362225.7 | 申请日： | 2013-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN103937835A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 周东明;杨勇;丁妙 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海巴斯德研究所 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;A61K39/125;A61P31/14 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 病毒 adc68 表达 载体 及其 构建 方法 | ||
1.一种制备腺病毒表达载体的方法，其特征在于，所述方法包括：将黑猩猩型腺病毒AdC68基因组分成4个片段，依次装入到骨架载体中，并且，用连接序列替换AdC68基因组中E1的大部份编码序列；所述的连接序列中，设置酶切位点I-Ceu I和PI-Sce I。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的4个片段分别是：
黑猩猩型腺病毒AdC68基因组第1-6025位；
黑猩猩型腺病毒AdC68基因组第6026-17279位；
黑猩猩型腺病毒AdC68基因组第17280-34196位；和
黑猩猩型腺病毒AdC68基因组第34197-36519位。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的连接序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
4.一种腺病毒表达载体，其特征在于，所述表达载体包括：改造的黑猩猩型腺病毒AdC68基因组序列；其中，E1的大部份编码序列由连接序列替换；
所述的连接序列中设置酶切位点I-Ceu I和PI-Sce I。
5.如权利要求4所述的腺病毒表达载体，其特征在于，所述的连接序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
6.如权利要求5所述的腺病毒表达载体，其特征在于，所述的腺病毒表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
7.如权利要求5所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的酶切位点I-Ceu I和PI-Sce I之间，还包括外源的抗原编码基因。
8.如权利要求7所述的表达载体，其特征在于，所述的外源的抗原是肠道病毒EV71的VP1抗原。
9.一种制备疫苗的方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)提供权利要求4所述的腺病毒表达载体；
(2)将外源的抗原编码基因插入到(1)表达载体的酶切位点I-Ceu I和PI-SceI之间；
(3)将(2)的重组表达载体感染病毒生产细胞，病毒在细胞内包装，从而获得具有免疫原性的疫苗。
10.一种用于制备疫苗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
权利要求4-8任一所述的腺病毒表达载体。
11.如权利要求10所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：
病毒生产细胞；和/或
抗原编码基因。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院上海巴斯德研究所，未经中国科学院上海巴斯德研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310362225.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
