[发明专利]人乳头瘤病毒E6蛋白可诱发同源蛋白间交叉反应性抗体的精细表位肽

说明书

技术领域

本发明属于免疫学和生物医药技术领域，具体涉及一种人乳头瘤病毒E6蛋白中能被单克隆抗体C1P5识别的最小基序肽及其应用。 

背景技术

宫颈癌是目前世界上导致女性死亡的第二大癌症，其威胁仅次于乳腺癌。全球每年约有50万人被诊断为宫颈癌，约有30万人死于此癌症，而中国的每年发病率则估计在13.5万，死亡人数5万。上世纪80年代初就确定了人乳头状瘤病毒(human papillomavirus，HPV)与宫颈癌的相关性。最新资料表明99.8%子宫颈癌活检标本中可检出HPV。因此，关注妇女生殖健康，各国科研人员长期以来一直就HPV的诊断、预防和治疗的方法途径展开研究。令人兴奋的是，2006和2007年首先已由美国默克(Merck)和英国葛兰素史克(GSK)制药公司研制成功二种预防性四价和二价HPV疫苗。 

但是，就HPV预防和治疗而言，目前这方面需要人类攻克的课题依然很多。例如，现已清楚感染女性生殖道等上皮组织的HPV型有120种之多，其中可经持续感染导致子宫颈癌的高危型HPV则存在20种左右[de Villiers EM，Fauquet C，Broker TR，et al.Classification of papillomaviruses.Virol2004，324：17–27；Parkin DM.The global health burden of infection-associated cancers in the year 2002.Int J Cancer，118：3030-3044，2006；de Sanjose S，Quint WG，Alemany L，et al.Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer：a retrospective cross-sectional worldwide study.Lancet Oncol2010，11(11)：1048-1056]，而目前已被许多国家批准临床应用的以上Gardasil和Cervarix预防性HPV疫苗主要是针对流行率最广的HPV16和18型的，虽然它们对其他一些高危型HPV也显示出一定程度的保护作用[Wheeler CM，Castellsague X，Garland SM，et al.Cross-protective efficacy of HPV16/18ASO4-adjuvanted vaccine against cervical infection and precancer caused by non-vaccine oncogenic  HPV types：4-year end-of-study analysis of the randomized，double-blind PATRICIA trial.Lancet Oncol,13(1)：100-110，2012]。因此，下一个已受到普遍关注的课题无疑是研发“通用”HPV疫苗，这对中国和亚洲妇女尤为重要，因为在这一地区妇女感染高危HPV型的流行率排序，在HPV16之后主要是HPV58和HPV52，而非通常排第二的HPV18[Huang S，Afonina I，Miller BA，Beckmann AM.Human papillomavirus type52and58are prevalent in cervical cancers from Chinese woman.Int J Cancer，70(4)：408-411，1997等]。 

此外，由于默克和葛兰素史克制药公司HPV四价和二价疫苗生产工艺复杂和综合成本高，其疫苗价格显然不适合在发展中国家推广应用，因而研制易制备储存价格低等突出优点的重组多表位肽疫苗，也是一个当前疫苗发展的重要方向。虽然目前的HPV治疗性多肽疫苗多选择HPV16或18型E6和E7蛋白上的细胞毒性T细胞表位(TCL/TcCE)肽，但也有研制靶向早期致癌性E6和E7蛋白，同时诱发CD4+、CD8+和抗体应答的治疗性HPV融合蛋白疫苗报道，提示也可研制组合它们B-和T-细胞表位的预防性HPV多表位肽疫苗，即通过产生抗体的体液应答，以及在癌前病变或宫颈恶性病变前排除它们对肿瘤特异性免疫应答而达到完全或部分清除HPV效果。