[发明专利]一种红托竹荪的菌种制备和保藏方法

说明书

技术领域

本发明涉及食用菌的菌种制备和保藏领域，特别是涉及一种红托竹荪的菌种制备和保藏方法。

背景技术

红托竹荪Dictyophora rubrovolota Zang,Ji et Lio是珍稀美味的食用菌，然而红托竹荪在贵州漫长的栽培过程中，出现了严重的菌种退化，导致上千亩的的栽培面积减产至绝收。因此红托竹荪的人工栽培，培育优良红托竹荪菌种是栽培成功的关键，因此，红托竹荪优良菌株的制备和保藏将起到重要作用。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种制备方法简便，保藏效果优良的红托竹荪的菌种制备和保藏方法。

为实现上述发明目的，本发明所提供的技术方案如下：

一种红托竹荪的菌种制备方法，包括如下步骤：

步骤一将马铃薯洗净，去皮，取180g-220g切成薄片放入容器中，加水450ml-550ml，温火煮沸至薄片酥而不烂，用四层湿润沙布过滤，取滤液备用；

步骤二取松针80g-120g放入容器中，加水450-550ml煮沸后10-20分钟，用四层湿润的沙布过滤，取滤液备用；

步骤三将步骤一和步骤二得到的滤液合并，补足至950-1050ml，向补足后的溶液中加琼脂粉18g-22g，麦芽糖18-22g，蛋白胨4g-6g，煮沸，用草木灰水溶液调节酸碱度至pH7.5-8.0；

步骤四趁热分装试管后进行高压蒸汽灭菌后，取出搁成斜面备用；

步骤五选取成熟未开伞的竹荪菌蛋，去掉泥沙，进行杀菌消毒处理；

步骤六从竹荪菌柄和菌裙部分挑取一小块组织，移接到步骤四得到的斜面培养基上，置24℃培养5-7天，待菌丝长满斜面试管后，再经过一次转管扩大培养，即得红托竹荪母种。

优选地，所述步骤四中高压蒸汽灭菌的压力为1kg／cm²，温度为121℃，灭菌时间为40分钟。

优选地，所述步骤五中选取成熟未开伞的竹荪菌蛋为野生资源采集的竹荪菌蛋。

进一步地，所述步骤五中杀菌消毒处理具体为：在无菌工作台上，将竹荪菌蛋用双氧水冲洗进行表面消毒，再无菌棉球擦拭竹荪菌蛋。

进一步地，所述步骤六中从竹荪菌柄和菌裙部分挑取一小块组织具体为：用解剖刀将竹荪菌蛋从中部切成两半，把切开的竹荪菌蛋中部白色部分挑取一小块组织。

本发明还提供了一种红托竹荪的菌种保藏方法，包括以下步骤：

步骤一将树枝条60-70重量份、麸皮12-17重量份、黄豆粉4-6重量份、麦芽糖1.5-2.5重量份、过磷酸钙2.5-3.5重量份、木屑8-12重量份混合搅拌均匀，加水调至含水量为60%-65%，用草木灰（优选采用草木灰干粉）调节酸碱度至pH7.5-8.5，制成培养料并装入菌种瓶内，塞上棉塞；

步骤二将装好培养料的菌种瓶进行灭菌处理；

步骤三待培养料温度不高于30℃时，无菌环境下，将红托竹荪的菌种接种至培养料中；

步骤四将接种后菌种瓶在24℃培养，待菌丝长满培养料后，将其放入10℃的温度下保藏30天，然后移至4℃进行保藏。

优选地，步骤三中的红托竹荪的菌种为权利要求1-5中任意一个权利要求所制备。

优选地，步骤二中的灭菌处理具体为：在灭菌锅内，1.5kg／m²压力下灭菌1.5h。

优选地，所述步骤一中将培养料装入菌种瓶内的方法具体为：边装边摇动，减少空隙，培养料装至菌种瓶高度的4/5，并清洗菌种瓶外表面和瓶口。

优选地，所述步骤一中PH值优选为8.0～8.5。

通过上述的制备方法制备的红托竹荪菌种优良，经过上述保藏方法保藏四年后，菌丝仍具有很好的活性，采用该菌丝进行出菇培育，出菇效果良好，红托竹荪原有的菌蛋和菌索受伤变紫色的性状也仍然保持，证明本发明所提供的制备方法和保藏方法可以有效保证菌种的优良，避免菌种退化。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

一种红托竹荪菌种的制备和保藏方法，具体为：