[发明专利]酶催化可控释放一氧化氮的新型生物材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种具有酶催化可控释放一氧化氮的壳聚糖大分子生物材料CS-NO，其特征在于具体合成方法包括：将一种具有酶催化可控分解释放一氧化氮的氮烯醇类NO供体化合物4-(2-叠氮乙醇)哌嗪-1-(O²-半乳糖)氮烯醇通过化学反应接枝到壳聚糖分子侧链；首先将大分子壳聚糖分散于水相中，加入戊炔酸，其中壳聚糖重复单元与戊炔酸的摩尔比为：1∶0.05-1∶0.5，在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐催化下冰浴中反应24小时，从而通过酰胺化反应将炔基接枝到壳聚糖分子侧基上，产物经透析纯化。第二步是通过点击化学反应将NO供体化合物4-(2-叠氮乙醇)哌嗪-1-(O²-半乳糖)氮烯醇与炔基化壳聚糖反应，采用无水硫酸铜、抗坏血酸钠做催化剂，恒温37℃搅拌反应24小时，产物经水透析3天，冷冻干燥得接枝NO供体的壳聚糖大分子CS-NO。

2.根据权利要求1所述的具有酶催化可控释放一氧化氮的壳聚糖大分子生物材料CS-NO，其制备方法为：将该材料制备成不同浓度的溶液用于局部注射，具体方法包括：将CS-NO以1-15毫克/毫升的浓度在水中分散，室温搅拌至完全溶解，即可制得CS-NO溶液；或通过浇铸方法制备薄膜，具体方法包括：将CS-NO配制成浓度5-15％的水溶液，均匀涂布在盖玻片上，室温晾干，真空干燥24小时；或通过冷冻干燥和静电纺丝等方法制备成多孔支架或微纳米纤维支架；或CS-NO材料可进一步通过溶液共混的方法与天然大分子如胶原、明胶、透明质酸、海藻酸钠等复合，获得不同组成比例和性能的天然复合材料，具体方法包括：将明胶、胶原等制成浓度为2％水溶液，冷却至室温后加入质量浓度为0.1-3％的CS-NO，充分搅拌至均匀，冷冻干燥得CS-NO/胶原复合多孔支架。

3.根据权利要求1所述的具有酶催化可控释放一氧化氮的壳聚糖大分子生物材料CS-NO，其应用于治疗糖尿病下肢缺血、皮肤损伤和心梗的治疗方法；具体用方法一所制备的可控释放一氧化氮的壳聚糖材料CS-NO溶液通过局部注射治疗糖尿病患者下肢缺血；还可以通过局部注射CS-NO溶液促进血管新生，治疗心梗；或者CS-NO与天然聚合物，包括明胶、胶原、透明质酸、海藻酸钠的复合多孔海绵或纤维膜可用于治疗皮肤损伤，一氧化氮缓释能够有效促进伤口愈合和皮肤修复。