[发明专利]小鼠抗人PRRT2单克隆抗体及其制备和应用

权利要求书

1.一种抗人PRRT2单克隆抗体，其特征在于，所述的抗人PRRT2单克隆抗体对应的抗原表位的序列如SEQ ID NO 3- SEQ ID NO 8中的任意一条所示。

2.如权利要求1所述的抗人PRRT2单克隆抗体，其特征在于，其对应的抗原表位的序列如SEQ ID NO 6 或者 SEQ ID NO 7所示。

3.一种抗人PRRT2单克隆抗体，其特征在于，它由保藏号为CGMCC No.7810的杂交瘤细胞产生。

4.一种产生抗人PRRT2单克隆抗体的杂交瘤细胞，其特征在于，它是分泌PRRT2抗体的小鼠骨髓瘤融合细胞株 9293-1hz-3P2，保藏号为CGMCC No.7810。

5.权利要求1所述的抗人PRRT2单克隆抗体的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

从PRRT2蛋白序列中选择1-6个肽片段作为抗原表位，通过接头将不同肽片段串联到一起；所述的抗原表位的序列选自SEQ ID NO 3- SEQ ID NO 8中的任意一条或者若干条；

合成抗原表位对应的目的cDNA序列，诱导表达串联多肽免疫原；

佐剂联合所述免疫原多点免疫小鼠，经细胞融合和筛选获得单克隆抗体。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的肽片段是长度为10个氨基酸、高亲水性、高抗原性、非信号肽、非跨膜区并且位于无序区域的肽。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的接头具有弱免疫原性。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的串联多肽免疫原的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所使用的佐剂选自：弗氏完全佐剂、铝、CpG、或其任意组合。

10.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述多位点免疫在以下位点中至少2个位点进行：颈背部、尾根、后足掌、后侧腹股沟、前腿腋窝、后腿肌肉。

11.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的筛选包括利用有限稀释法亚克隆和ELISA检测。

12.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的筛选包括通过Western blot 和细胞免疫荧光进行特异性验证所得抗体。

13.权利要求1-3中任意一种抗人PRRT2单克隆抗体的应用，其特征在于，所述的抗人PRRT2单克隆抗体能够特异性识别PRRT2蛋白。