[发明专利]具有抗肿瘤活性的酰胺取代鬼臼类衍生物及其制备方法和用途

权利要求书

1.具有抗肿瘤活性的酰胺取代鬼臼类衍生物或其盐，其特征在于，其结构式为式(Ⅴ)所示：

其中，R₁选自或

2.一种制备权利要求1所述酰胺取代鬼臼类衍生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：通过酰胺取代反应，将2-吡嗪羧酸、5-甲基-2-吡嗪羧酸、茶碱乙酸以及没食子酸引入到4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位，得到酰胺取代鬼臼类衍生物粗产品。

3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的酰胺取代反应包括以下步骤：（1）将4′-去甲表鬼臼毒素的C环4位活化生成4-β-N₃-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素；（2）将4-β-N₃-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素C环4位活化生成4-β-NH₂-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素；（3）将4-β-NH₂-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素溶于有机溶剂中，加入2-吡嗪羧酸、5-甲基-2-吡嗪羧酸、茶碱乙酸或没食子酸，搅拌进行反应，即得酰胺取代鬼臼类衍生物粗产品。

4.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：

所述步骤（1）的活化为迭氮取代反应，用叠氮化钠和三氟乙酸对4′-去甲表鬼臼毒素C环4位进行活化；优选的，所述的活化包括以下步骤：将4’-去甲基表鬼臼毒素干燥，加入叠氮化钠和三氯甲烷，于室温下预先反应5min，再在氮气保护下，边搅拌边滴加三氟乙酸，于室温下反应10min，即得4-β-N₃-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素粗产品；

所述步骤（2）的活化为氨基取代反应，用锌粉、甲酸铵以及四氢呋喃对所述步骤（1）所得的4-β-N₃-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素进行活化；优选的，所述的活化包括以下步骤：将4-β-N₃-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素，锌粉和甲酸铵置于四口瓶中，抽真空通氮气三次，再加入85%四氢呋喃，于室温下反应24h，即得4-β-NH₂-4-脱氧-4′-去甲表鬼臼毒素粗产品。

5.按照权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；所述的搅拌为在真空条件下进行搅拌，其搅拌转速为50～800转/分钟，优选为600转/分钟；酰胺取代反应时间为24～48小时。

6.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，还包括：

（1）将酰胺取代鬼臼类衍生物粗产品旋转蒸发浓缩，用二氯甲烷提取过滤得滤渣，再用体积比为1:1的二氯甲烷:甲醇复溶，真空干燥，得到初步纯化的酰胺取代鬼臼类衍生物产物，再将初步纯化的酰胺取代鬼臼类衍生物产物通过二氯甲烷溶剂溶解，并用水反复洗涤，收集有机层，真空干燥，得到待分离纯化样品；

（2）将待分离纯化样品依次使用硅胶柱层析和凝胶柱层析分离，即得式（Ⅴ）化合物的纯品。

7.按照权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述的硅胶柱层析的分离方法包括：①硅胶柱层析为正相硅胶柱层析，正相硅胶以低极性有机溶剂拌匀后装柱，以洗脱剂平衡；所述的洗脱剂优选是由体积比为40:1的氯仿和甲醇组成；②将样品以洗脱液溶解，进行上样吸附，然后用洗脱剂洗脱，收集洗脱液，将样品挥干并重结晶；

所述的凝胶柱层析分离方法包括：①凝胶以甲醇浸泡；将处理好的凝胶装柱，以甲醇平衡；②将经硅胶柱层析初步分离后的样品溶于甲醇中，进行上样吸附，然后用甲醇洗脱，收集洗脱液，将样品中溶剂挥干并重结晶。