[发明专利]一种固定化头孢菌素C酰化酶的制备方法有效
| 申请号： | 201310276375.6 | 申请日： | 2013-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN103343117A | 公开（公告）日： | 2013-10-09 |
| 发明（设计）人： | 罗晖;韩凯华;常雁红;魏艳梅;何华;于慧敏;李强;沈忠耀 | 申请（专利权）人： | 北京科技大学 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14 |
| 代理公司： | 北京市广友专利事务所有限责任公司 11237 | 代理人： | 张仲波 |
| 地址： | 100083*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 固定 头孢菌素 酰化酶 制备 方法 | ||
1.一种制备固定化头孢菌素C酰化酶的方法，其特征在于：使头孢菌素C酰化酶在醋酸盐和/或碳酸氢盐存在下与载体进行固定化。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述醋酸盐选自醋酸钠、醋酸钾、醋酸铵或它们的任意组合。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述碳酸氢盐选自碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢铵或它们的任意组合。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于：所述载体是经活化的环氧基载体或经活化的氨基载体。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述环氧基载体直接用磷酸钠缓冲液浸泡震荡进行活化；所述氨基载体经过戊二醛交联进行活化。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于：所述醋酸盐和/或碳酸氢盐的浓度为50mM-1000mM，或者400mM-600mM。
7.一种制备固定化头孢菌素C酰化酶的方法，包括以下步骤：
（a）载体活化：在使用环氧基载体情况下，直接用磷酸钠缓冲液浸泡震荡，在使用氨基载体情况下，经过戊二醛交联进行活化；
（b）将头孢菌素C酰化酶、醋酸盐和/或碳酸氢盐和步骤（a）活化的载体在磷酸钠缓冲液中混合，调节pH值为7.0-9.0，室温搅拌2-40h；
（c）将步骤（b）得到的固定化酶过滤，任选地洗涤和干燥。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述醋酸盐选自醋酸钠、醋酸钾和醋酸铵；所述碳酸氢盐选自碳酸氢钠、碳酸氢钾和碳酸氢铵。
9.根据权利要求7或8或所述的方法，其特征在于：所述醋酸盐和/或碳酸氢盐的浓度为50mM-1000mM；或者400mM-600mM。
10.由权利要求1-9任一项所述的方法得到的固定化头孢菌素C酰化酶。
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