[发明专利]蜈蚣的活性多肽及其在制药中的应用

权利要求书

1.一种蜈蚣活性多肽，其特征在于所述提取、分离、纯化和鉴定的方法包括以下步骤： 

a、取蜈蚣细粉，加一定量一定浓度的乙醇回流提取两次，过滤，合并滤液； 

b、所得滤液在水浴下挥干乙醇，适量蒸馏水溶解，离心，取上清液用石油醚萃取，待分层后，取水层浓缩至一定量，得墨绿色的蜈蚣粗提液； 

c、取所述蜈蚣粗提液，加入适量海藻酸，搅拌，过滤，所得滤渣用稀盐酸少量多次洗脱海藻酸，得绿色的洗脱液； 

d、向所述洗脱液中加入氯化钠至饱和，搅拌，置冰箱4℃静置过夜至完全析出并分层，收集悬浮于液面的蛋白类物质，冷冻干燥，得多肽粗品； 

e、取多肽粗品用蒸馏水溶解成一定的浓度，上样，用蒸馏水做洗脱剂，sephadex凝胶柱分离，收集峰1和峰2，冷冻干燥。 

f、取峰1和峰2的冷冻样品，进行液相色谱分离，得到纯度更高的两个多肽样品1和2，经质谱鉴定，蜈蚣活性多肽分子量介于13000～14000。 

2.根据权利要求1所述活性多肽提取，其特征在于a步骤中所说乙醇的浓度优选30％～85％，更进一步优选65％；优选乙醇用量为药材的2～6倍量，更进一步优选第一次提取用量为4倍量，第二次提取用量为3倍量；提取时间优选为0.5小时～4小时，更进一步优选第一次提取时间为1.0小时，第二次提取时间为0.5小时。 

3.根据权利要求1所述活性多肽分离，其特征在于b步骤中所说的水浴温度优选40～90℃，更进一步优选75℃；离心机转速优选4000转/分钟；离心时间，优选5～30分钟，更进一步优选15分钟。 

4.根据权利要求1所述活性多肽分离，其特征在于c步骤中以苦味酸作为检查多肽指示剂，搅拌时间优选0.5～3小时；洗脱海藻酸所用的稀盐酸，优选浓度为0.05～0.5mol/L，更进一步有选为0.2mol/L。 

5.根据权利要求1所述活性多肽，其特征在于e步骤中所说核酸蛋白检测仪的检测波长优选280nm。 

6.根据权利要求1所述活性多肽，其特征在于f步骤中所说液相色谱分离纯化，优选反相液相色谱，流动相优选乙腈、水和三氟醋酸的组成。 

7.具有活性作用的蜈蚣多肽，其特征在于多肽分子量介于13000-14000之间，其镇痛活性最强的多肽分子量在质谱图中更明确标示为13616.796道尔顿。 

8.根据权利要求1所述活性多肽，在镇痛和心脑血管药物中的应用。 

9.根据权利要求7和8所述的应用，其特征在于其中所述的药物剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、注射剂、口服液或丸剂。