[发明专利]一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种鹿瓜多肽新的制备方法。 

背景技术

以鹿骨和甜瓜子为原料的药物制剂，主要是鹿瓜多肽注射制剂，该制剂具有调节骨代谢、刺激成骨细胞增殖、促进新骨形成的作用，亦可调节钙鳞代谢、增加骨钙沉积、防止骨质疏松，并具有抗炎、镇痛、抗风湿等作用，已在临床广泛使用。 

鹿瓜多肽注射制剂中骨诱导多肽类生物因子可有效促进机体内影响骨形成和吸收的骨源性生长因子的合成，包括骨形态发生蛋白(BNPs)、β-转化生长因子(TGF-β)和成纤维细胞生长因子(FGF)等，从而具有多种生物活性、促进细胞有丝分裂与分化的作用，并具有容骨活性。其中BMPs是一种高效诱导物质，是间充质细胞向骨系细胞分化的最初信号分子，能诱导血管周围游动的间充质细胞转化为不可逆性的骨系细胞，即软骨细胞和成骨细胞，从而促进骨痂形成，诱导新骨形成，促进骨折修复；还可调节细胞外基质成分的改变，通过与TGF-β和FGF相互之间地协调作用，更好地诱导新骨形成，使骨组织更成熟。TGF-β则是一族具有多种的蛋白多肽，对成骨细胞及成软骨细胞有促进分化或降低分化的双重作用，与多种因子如细胞外基质和其他分化调节生长因子一起协同参与对细胞分化的调节，也可促进细胞外基质的合成，并对其新合成的基质降解有显著抑制作用；对于成骨细胞也可促进其合成I型胶原、骨粘连素和骨桥蛋白；同时，TGF-β对淋巴细胞和巨噬细胞的作用表明，它既能缓解炎性反应的破坏性，又能协助巨噬细胞来源的某些细胞因子在组织修复中发挥作用。FGF 是一组肝素粘合多肽，可刺激细胞的趋向移动、增殖和分化，增加合成胶原细胞的数量，促进骨胶原蛋白及非胶原蛋白的合成，增加骨钙素的合成。甜瓜子提取物是从葫芦科植物甜瓜的成熟干燥种子经特殊工艺提取而成，能降低骨折局部毛细血管通透性，减少炎性渗出促进局部血运障碍的恢复；能降低全血粘度及红细胞聚集程度，改善骨痂局部的血液循环，为骨细胞提供一个良好的供血环境；还能抑制前列腺素的释放，达到止痛效果。在促进骨折早期愈合中，甜瓜子提取物与补充的骨诱导多肽类生物因子具有协同作用，可促进骨源性生长因子的合成。鹿瓜多肽富含的多种游离氨基酸为骨细胞合成BNPs、TGF-β和FGF等骨源性生长因子提供原料，从而促进骨源性生长因子的合成。其中的有机钙、磷离子可参与钙磷代谢，维持骨容量。 

临床应用表明，以鹿骨和甜瓜子为原料的注射制剂是治疗骨折不愈合、骨质疏松症、风湿、类风湿性关节炎、腕舟状骨缺血性坏死和软组织损伤等的有效药物，在骨科的应用前景广阔。 

随着该制剂的临床应用越来越广泛，出现一些不良反应，虽然不良反应率比较低，但药物关系到人的生命，提高其产品质量是重中之重。 

发明内容

基于上述原因，申请人采用高温水提取技术、超滤技术相结合的方法，得到鹿骨提取物和甜瓜子提取物，混合后超滤，制备成注射制剂，该方法制备得到注射制剂高分子量物质不超过5％，稳定性试验表明，该制剂具有更好的稳定性。 

本发明通过下述技术方案实现的。 

一种鹿瓜多肽注射制剂的制备方法，其制备方法为：鹿骨和甜瓜子的重量比为1-4∶1-4，鹿骨采用高温水提取，酸调pH值，碱调pH值，超滤，获得鹿 骨提取液；甜瓜子采用高温水提取，酸调pH值，碱调pH值，离心后超滤，获得甜瓜子提取液；将鹿骨提取液和甜瓜子提取液混合后，超滤，制备成注射液；或者将鹿骨提取液和甜瓜子提取液混合后，超滤，冷冻干燥，制备成粉针剂。 

其中鹿骨提取液制备方法为： 

取鹿骨去掉骨髓，粉碎，加入鹿骨重量的2-4倍的注射用水，120℃-125℃提取3次，每次3小时-5小时，合并提取液，过滤，滤液用酸调pH值为2.5-3.5，0℃-5℃静置12-24小时，过滤，滤液用碱调pH9.0-11.0，0℃-5℃静置12-24小时，过滤，滤液用酸调pH值6.5-7.5，滤液用截取分子量为10万的超滤膜超滤，保留透过液，透过液用截取分子量为1万的超滤膜超滤，保留透过液，透过液用截取分子量为8000的超滤膜超滤，保留透过液，浓缩至含多肽含量1-3mg/ml，得到鹿骨提取液； 

其中甜瓜子制备方法为：