[发明专利]小檗碱在制备减肥药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药制备领域，特别涉及小檗碱在制备抑制脂肪细胞自噬药物及制备治疗肥胖症药物中的应用。

背景技术

随着经济水平的提高、人们饮食结构的改变、运动量的减少，导致肥胖症的患病率迅速上升，据估计目前全世界超重或肥胖人口约达10亿。肥胖症作为代谢综合征的主要组分之一，与多种疾病如2型糖尿病、血脂异常、高血压、冠心病密切相关，严重危害人类的健康。

近年来研究发现，自噬在肝脏和脂肪组织的脂质代谢方面发挥着重要作用，自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。所以，自噬现象为肥胖症的治疗提供了新的思路。在正常生长条件下，营养物质丰富，自噬作用保持在一个基础水平，主要用于管家的目的，它为细胞提供一种常规的―垃圾清理服务，如长寿蛋白质和受损细胞器的降解，这样的不断更新对静止的终止分化的细胞尤为重要；在饥饿的条件下，自噬被进一步诱导，为细胞生存提供额外的内部营养，自噬可以由能量应激或广泛的其他应激诱导，大多数是为了重要蛋白的合成重新利用氨基酸，或者为了ATP的生成提供分解代谢的底物。尽管自噬不可能清除所有的代谢垃圾，但是自噬能防止疾病的发生，自噬的缺陷与人类许多疾病密切相关，如肝病、神经退行性病变、癌症和其他的代谢综合征脂肪是重要的能量代谢器官和内分泌器官，研究表明在脂肪细胞中，自噬可以降解线粒体及胞质，调节脂肪细胞分化。

小檗碱是一种异喹啉类生物碱，是中药黄连的主要成分，其化学结构式如下：

以往研究已经证实小檗碱具有很多药理作用包括抗菌，抗肿瘤，能够抑制炎症因子TNF-α、IL-6等的表达尤其是在肥胖的个体有明显的抗炎症作用，最近的研究发现小檗碱能够降血糖，改善胰岛素抵抗作用。

C3H10T1/2细胞系是在1973年首次从14到17天的C3H小鼠胚胎细胞分离出来，这些细胞在培养过程中表现出成纤维细胞形态，在功能上类似于间充质干细胞，已有文献证实Gdf6和Bmp4均能诱导C3H10T1/2向脂肪细胞系分化，表现出脂肪细胞的特征。

自噬途径是否参与小檗碱对脂质代谢的调节作用，并没有相关的研究。本发明通过小檗碱对C3H10T1/2脂肪细胞自噬的影响，监测成熟脂肪细胞中自噬对脂质代谢的调控，为肥胖症的治疗提供新的药物靶点和治疗方法。

发明内容

本发明的目的是提供小檗碱抑制C3H10T1/2脂肪细胞自噬方面提供确切的实验数据，为临床上能更合理的将小檗碱应用于肥胖患者的治疗提供理论依据。

本发明涉及小檗碱在制备治疗肥胖症药物中的应用。

本发明涉及小檗碱在制备抑制脂肪细胞自噬药物中的应用。

所述脂肪细胞为C3H10T1/2脂肪细胞。

自噬（autophagy）是真核细胞特有的生命现象，细胞通过形成双层膜的自噬体包裹自身受损或老化的细胞器和大分子，然后与溶酶体结合，实现对内容物的降解。

微管相关蛋白1的轻链3（LC3）是酵母Atg8在哺乳动物细胞中的同源蛋白，细胞自噬时，Atg-8会切除其C端的一段氨基酸，后者与磷脂酰乙醇胺（PE）结合后，结合到细胞膜上从而形成LC3-Ⅱ（LC3-PE）。LC3-Ⅱ是唯一一种可靠的与自噬相关的蛋白标记。在酵母中，自噬被诱导时Atg8的含量至少增加十倍。在哺乳动物细胞，自噬被诱导时，LC3的总含量没有太大变化，但LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转变增加。p62/SOSTM1偶联于LC3,作为自噬的底物，在晚期被降解，所以细胞内整体p62水平的表达与自噬活性呈负相关。因此，可用Western印迹的方法检测细胞内LC3的转化及p62的表达变化，来反应自噬的发生情况。

本发明现将C3H10T1/2细胞进行培养及诱导分化成熟脂肪细胞，然后通过小檗碱对成熟的C3H10T1/2脂肪细胞自噬标志蛋白LC3及自噬底物P62的影响测试、溶酶体抑制剂氯喹检测C3H10T1/2脂肪自噬通量变化测试和透射电镜观察自噬体数量变化情况，来检测小檗碱能否抑制C3H10T1/2脂肪细胞自噬现象，为临床上能更合理的将小檗碱应用于肥胖患者的治疗提供理论依据。通过本发明的检测，所有的检测结果表明：小檗碱能抑制C3H10T1/2脂肪细胞自噬，所以，小檗碱在治疗肥胖症的药物中有很好的疗效。

本发明具有以下优点：