[发明专利]平阳霉素及其同族化合物的铜螯合物的纯化方法

说明书

技术领域

本发明属药物化学及分离纯化技术领域，具体涉及一种平阳霉素及其同族化合物的铜螯合物的纯化方法。

背景技术

平阳霉素（Pingyangmycin）及其同族化合物博安霉素（Boanmycin）、博宁霉素（Boningmycin）是由我国学者自主研制开发的抗肿瘤抗生素，其中平阳霉素和博安霉素已投入临床应用，它们都属博来霉素家族。进口的博来霉素（bleomycin）主要成分为博莱霉素A2和B2，平阳霉素与博来霉素A5的结构相同，博安霉素与博来霉素A6的结构相同，博宁霉素是博安霉素末端氨体游离氨基的乙酰化物。平阳霉素现被收载于中华人民共和国药典二部（2010版），是我国临床较常用的抗癌药物。

临床前研究表明，平阳霉素及其同族化合物博安霉素、博宁霉素对一系列的移植性肿瘤以及裸鼠移植的人体癌瘤均有显著疗效，同时对小鼠的急性毒性和肺毒性明显低于博莱霉素。

临床研究表明，平阳霉素对头颈部癌瘤、淋巴瘤等有较好的疗效，尤其对于口腔科癌瘤有显著疗效。平阳霉素很少抑制脊髓造血系统及免疫功能，可与其他化疗药物联合，可用于因前期治疗造血功能已经受损的患者。目前平阳霉素临床应用已得到进一步扩展，尤其在用于治疗血管瘤、淋巴管瘤以及尖锐湿疣及眼科的翼状胬肉效果显著。近年来单克隆抗体与平阳霉素的偶联物在动物实验显示具有高度疗效作用，提示其在研制抗体靶向药物中的潜在价值【甄永苏等，抗肿瘤抗生素平阳霉素研究与临床应用40年，抗生素杂质，2009，vol34(10)，577～580】。博安霉素对头颈部肿瘤有显著的疗效，对脊髓造血系统及免疫功能影响小，且肺毒性低，并且对肝癌细胞也有较强的抑制作用。博宁霉素除抗肿瘤作用外，对银屑病、溢脂性皮炎和乳头瘤病毒引起的尖锐湿疣、扁平疣等有良好的作用。

平阳霉素目前的生产工艺是先经微生物发酵产生平阳霉素等十余种组分组成的复合物，然后加入铜盐形成平阳霉素铜螯合物，再经反复离子交换柱层析分离纯化得到较高纯度的平阳霉素铜螯合物，再经脱铜处理，得到平阳霉素【许鸿章等，平阳霉素的分离 和鉴别，药学学报，1980，vol15(10)，609～614】。博安霉素和博宁霉素的生产工艺与平阳霉素类似，都是由微生物发酵，然后形成铜螯合物，经过纯化后再脱铜得到博安霉素和博宁霉素【许鸿章等，争光霉素A6和它在争光霉素复合物的地位，药学学报，1988，vol23(9)，667～671】。博宁霉素也可以由博安霉素含铜品通过化学合成的方法乙酰化而得到博宁霉素含铜品，再脱铜得到博宁霉素。

平阳霉素铜螯合物具有鲜艳的蓝色，较原化合物稳定，是平阳霉素及其同族化合物生产工艺中的重要中间体。由于平阳霉素及其同族化合物和铜螯合物为极性很大的水溶性成分，分离纯化有相当的难度，因此铜螯合物的纯度成为制约平阳霉素及其同族化合物最终产品质量的瓶颈。目前它们铜螯合物的分离纯化一直使用离子交换凝胶填料，主要为葡聚糖骨架的CM—sephadex—C一25填料。该填料溶胀率高，在不同的盐溶液中体积变化很大，为非刚性填料，不能加压，为达到较高的分离度，柱径比一股在30以上，使得每个循环的周期很长，无法实现快速分离，整体效率低下。同时由于CM—sephadex—C一25本身的分离度不是很高，造成有些杂质无法去除，使得最终产品的纯度不高，质量较低。中华人民共和国药典二部(2010版)盐酸平阳霉素项下规定本品按干燥品计，含盐酸平阳霉素不得少于85.0％，明显低于一股化药的要求。目前在市场流通的盐酸平阳霉素冻干粉针剂，用药典的液相条件检测，按照面积百分比计，纯度在92％左右(如下表1及图1)。博安霉素情况相似，这和当前的平阳霉素及其同族化合物和铜螯合物分离纯化的工艺水平密切相关。

表1

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