[发明专利]一种不用琼脂的组培培养基制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域中的植物组织培养技术，具体涉及到一种不用琼脂的组培培养基制备方法。

技术背景

植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科。

传统的植物组培在实施过程中，培养基配制基本上是：组分是由MS培养基+植物组培时的不同材料和不同培养阶段所添加对应的激素+琼脂组成，然后将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH5.6-5.8，趁热分装于100mL组培瓶中，每瓶约30mL。待培养基冷却凝固后，盖上组培盖，或盖上封口膜并用棉线扎牢，然后在高压灭菌锅中121℃(1kg/cm2)下灭菌20min。

发明内容

本发明的目的是提供全新的一种不用琼脂的组培培养基制备方法。具体的是：具体的是：首先根据需要制备营养液，然后用高吸水树脂将营养液吸收起来固化成型，接着分装于组培瓶中，最后按常规方法将培养基进行消毒灭菌而得生产用组培培养基。通过实施本发明，利用高吸水树脂代替琼脂，营养液制备好后直接由吸水树脂吸收并固化成型，省略了传统培养基使用琼脂时还需要加热溶解才分装到组培瓶里。还可大幅度降低成本，1000ml的培养基固化成型仅需2克高吸水树脂，成本约0.8～1毛钱，而传统的培养基制备时，1000ml的培养基需要10克琼脂，成本约2元钱。实施本发明，更有利于植物组培工厂化、规模化、集约化生产。

所述的高吸水树脂(Super Absorbent Polymer，SAP)是一种新型功能高分子材料。具有亲水基团、能大量吸收水分而溶胀又能保持住水分不外流的合成树脂，如淀粉接枝丙烯酸盐类、接枝丙烯酰胺、高取代度交联羧甲基纤维素、交联羧甲基纤维素接枝丙烯酰胺、交联型羟乙基纤维素接枝丙烯酰胺聚合物等，一般可以吸收相当于树脂体积100倍以上的水分，最高的吸水率可达1000％以上，高吸水聚合物具有无毒、对人体无刺激性、无副反应、不引起血液凝固等特点，近年来，已被广泛应用于医药领域。一般作为医用材料，如尿布、卫生巾等，工业上亦用作堵漏材料。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种不用琼脂的组培培养基制备方法，技术方案中包括如下步骤：

1、选择吸水倍数是500倍以上的高吸水树脂来做固化剂。

2、根据植物组培时的不同材料和不同培养阶段用MS培养基组方+对应的激素配制成营养液。

3、按量将高吸水树脂添加到营养液中，将营养液吸收起来固化成型。

4、按量将固化成型的营养液分装于组培瓶中。

5、按常规方法将培养基进行消毒灭菌而得生产用组培培养基。

与现有的技术相比，本发明既有如下优点：

1、本发明所提出的组培培养基制备方法措施独特，容易实施。

2、通过实施本发明，利用高吸水树脂代替琼脂，营养液制备好后直接由吸水树脂吸收并固化成型，省略了传统培养基使用琼脂时还需要加热溶解，才分装到组培瓶里。

3、通过实施本发明，1000ml的培养基固化成型仅需2克高吸水树脂，成本约0.8～1毛钱，而传统的培养基制备时，1000ml的培养基需要10克琼脂，成本约2元钱；因此，采用本发明可大幅度降低成本。

4、通过实施本发明，培养基成型后，因为其组织结构是颗粒状的，所以不像传统培养基那样板结紧凑，而是松散，在生根培养阶段更有利根系生长。

5、实施本发明，更有利于植物组培工厂化、规模化、集约化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。

一种不用琼脂的组培培养基制备方法，技术方案中包括如下步骤：

1、选择吸水倍数是500倍以上的高吸水树脂来做固化剂。

2、根据植物组培时的不同材料和不同培养阶段用MS培养基组方+对应的激素配制成营养液。

3、按量将高吸水树脂添加到营养液中，将营养液吸收起来固化成型。

4、按量将固化成型的营养液分装于组培瓶中。

5、按常规方法将培养基进行消毒灭菌而得生产用组培培养基。

具体实施方式如下：

1、选择吸水倍数是500倍的高吸水树脂来做固化剂。