[发明专利]一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法

权利要求书

1.一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：

(1)采用计算机断层扫描技术分别对预期修复的骨组织和经脱钙处理的骨组织经行扫描，获得预期修复的骨组织三维多孔结构的数字模型，通过布尔运算得到骨组织三维负型数字模型；

(2)利用三维快速成型技术，采用三维快速打印机，以石蜡粉末作为成型材料，制得骨组织三维多孔支架的石蜡负型；

(3)选取能分泌细菌纤维素的菌株活化制备成种子醪液，然后将种子醪液均匀滴加在经灭菌处理的石蜡负型上，加入发酵培养基培养，发酵产物经石蜡脱除、纯化处理，得到细菌纤维素三维多孔支架；

(4)将细菌纤维素三维多孔支架浸泡在CaCl₂溶液中，经去离子水清洗后浸泡在Na₂HPO₄溶液中，然后经去离子水清洗、冷冻干燥，得到细菌纤维素与羟基磷灰石复合的矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架。

2.如权利要求1，一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：所述的预期修复的骨组织为：缺损部位骨组织和/或与缺损部位相似、相对应的骨组织部位，所述的经脱钙处理的骨组织：选取与预期修复骨组织具有相似部位、相似形状和/或相似骨密度的脱钙骨。

3.如权利要求1，一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：所述的能分泌细菌纤维素的菌株是木醋杆菌、根瘤菌属、八叠球菌属、假单胞菌属、无色杆菌属、产碱菌属、气杆菌属或固氮菌属中的一种或几种。

4.如权利要求1，一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：所述的菌株/石蜡混合发酵方法为：将菌株浓度为50～95%的种子醪液以点阵方式均匀滴加在石蜡负型上，10～20min后加入发酵培养基，发酵培养温度为20～30℃，时间为6～14d。

5.如权利要求1，一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：所述的石蜡脱除、纯化处理方法为：在50～70℃的温度下，发酵产物分别在蒸馏水、异丙醇和无水乙醇中浸泡5-10min，然后在70～100℃的温度下，在重量百分比为1～8%的NaOH水溶液中洗涤4-6h，再用蒸馏水反复冲洗至中性。

6.如权利要求1，一种矿化细菌纤维素三维多孔骨组织修复支架的制备方法，其特征是：所述的CaCl₂与Na₂HPO₄溶液浓度：其中CaCl₂溶液为50-100mmol/L，且Ca离子与PO₄离子的摩尔当量比为5:3，所述的浸泡温度为20～25℃，时间为24-48h。