[发明专利]一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法

权利要求书

1.一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）脱脂：取甘蔗渣以乙醇浸泡、回流，滤过后滤渣烘干；

（2）提取：步骤（1）所得滤渣经水提醇沉法得粗多糖；

（3）脱蛋白：步骤（2）所得粗多糖用水溶解，通过sevag法将蛋白分离；

（4）透析：步骤（3）所得的粗品浓缩，离心，将上清液在水中透析，去除小分子杂质，收集甘蔗渣多糖溶液；

（5）冷冻干燥：步骤（4）所得甘蔗渣多糖浓缩后冷冻干燥，得甘蔗渣多糖干品；

（6）纯化：将步骤（5）所得甘蔗渣多糖经离子交换色谱法与凝胶色谱法纯化；

（7）冷冻干燥，得到甘蔗渣多糖纯品粉末。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的步骤（1）中，取一定量的甘蔗渣，加入6-12倍量95%乙醇浸泡30-60min，回流4-8h，滤过，滤渣烘干。

3.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的水提醇沉法是：将步骤（1）所得滤渣依次加8-12倍量、6-10倍量水回流提取一次以上，每次2-4h，滤过合并滤液，滤液浓缩，加3-5倍量95%乙醇，静置，抽滤，滤渣经干燥得粗多糖。

4.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的sevag法是：将步骤（2）所得甘蔗渣粗多糖用水溶解，将氯仿按多糖溶液1/5体积加入，随之加入氯仿体积1/5的正丁醇，混合剧烈振摇搅拌后，以2000-6000rpm，10-30min离心，出去蛋白，如此重复7-10次。

5.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的透析是：步骤（3）所得的粗品浓缩，离心，得上清液，用截留分子量3000的透析袋将上清液在流水中透析40-55h，再在去离子水中透析20-30h，收集甘蔗渣多糖溶液。

6.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的步骤（6）中，离子交换色谱法采用阴离子交换色谱柱，优选DEAE-52纤维素、DEAE-32纤维素、DEAE-Sepharose fast flow、DEAE-Cellulose。

7.根据权利要求1所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的步骤（6）中，凝胶色谱法采用葡聚糖凝胶柱、琼脂糖凝胶凝胶柱或DEAE-葡聚糖凝胶柱，优选Sephadex G-50、Sephadex G-75、Sephadex G-100、Sephadex G-150、Sephadex G-200、Sephacryl S-100、Sephacryl S-200、Sephacryl S-300、Sephacryl S-400、Sephacryl S-500、Sephadex LH-20、Sephadex LH-60、DEAE Sepharose CL-6B、DEAE Sephadex A-50、DEAE Sephadex A-25。

8.根据权利要求1或6所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的步骤（6）中，离子交换色谱法为：采用阴离子交换色谱柱，流速0.2-0.8ml/min，先后以水、0-0.5mol/LNaCl洗脱，分离出两个组分。

9.根据权利要求1或7所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的步骤（6），凝胶色谱法中至少过两次凝胶柱，在后的凝胶柱的分离精度高于在先的凝胶柱。

10.根据权利要求9所述的一种甘蔗渣多糖分离纯化的方法，其特征在于：所述的的步骤（6）中，凝胶色谱法为：i.将经离子交换色谱法分离出的组分上第一凝胶柱纯化，以水洗脱，流速0.2-0.8ml/min，浓缩后冷冻干燥；ii.然后上第二凝胶柱，以水洗脱，流速0.2-0.8ml/min。