[发明专利]一种注射用益气复脉中糖苷类大分子物质的检测方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种中药组合物的检测方法，特别涉及一种注射用益气复脉中糖苷类大分子物质的检测方法。

背景技术：

注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬、五味子制成的用于静脉滴注的中药复方制剂，具有益气复脉，养阴生津的疗效。主要用于冠心病劳累性心绞痛气阴两虚证，症见胸痹心痛，心悸气短、倦怠懒言、头晕目眩、面色少华、舌淡、少苔或剥苔，脉细弱或结代；冠心病所致慢性左心功能不全II、III级气阴两虚证，症见心悸、气短甚则气急喘促，胸闷隐痛，时作时止，倦怠乏力，面色苍白，动则汗出，舌淡、少苔或剥苔，脉细弱或结代。

注射用益气复脉(冻干)性状：本品为浅黄色的疏松块状物；有引湿性。取1瓶内容物，加水2～3ml溶解后，为棕红色澄明液体。用法用量：静脉滴注。每日1次，每次8瓶，用250ml～500ml 5％葡萄糖注射液或生理盐水稀释后静脉滴注。每分钟约40滴。疗程2周。

注射用益气复脉(冻干)中主要成分为糖类、皂苷类、木脂素类等；其中主要活性成分为皂苷类和木脂素类，其分子量大多数不超过1000。而处方药材中相对分子量 较大的物质如蛋白质、多肽、多糖等在提取和制剂工艺过程中是作为杂质而去除的物质。成品中不应存在，为保证成品的质量，有必要对这些大分子物质进行定性和定量的检测，本研究正是基于上述情况，建立了高效凝胶渗透液相色谱-蒸发光散射检测法并对注射用益气复脉(冻干)中可能存在的大分子量物质进行检测，此方法简便、快捷和灵敏，可用于注射用益气复脉(冻干)中大分子物质的检查，具有实用意义。

发明内容：

本发明提供一种注射用益气复脉中糖苷类大分子物质的检测方法，所述方法为用高效凝胶渗透液相色谱-蒸发光散射检测法对注射用益气复脉样品进行检测，其中，进样检测参数为：

色谱柱为Waters Ultrahydrogel^TM 250凝胶色谱柱；柱温25-35℃；流动相为甲酸-水1:2500-7500，流动相pH值为2-7；流速0.25-0.75ml·min^-1；检测器：飘移管温度85-100℃，气压0.1-0.2MPa。

其中进样检测流动相优选为甲酸-水1:5000，流速0.5ml·min^-1、流动相pH值为3；检测器参数优选：飘移管温度90℃，气压0.17MPa；

上述注射用益气复脉中糖苷类大分子物质的检测方法，优选检测参数为：柱温30℃；流动相为甲酸-水1:5000，流动相pH值为3；流速0.5ml·min^-1；检测器参数：飘移管温度90℃，气压0.17MPa。

上述用高效凝胶渗透液相色谱-蒸发光散射检测法对注射用益气复脉(冻干)样品的检测方法包括：

被检测样品的配制，方法如下：

取注射用益气复脉(冻干)用超纯水配制成浓度约为50-200mg·mL^-1的溶液，摇匀，经0.25-0.65μm微孔滤膜过滤，得到被检测样品。

进样检测，方法如下：

取续滤液，注入色谱仪，进样量10-40μL，

所述色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱为Waters Ultrahydrogel^TM 250凝胶色谱柱(7.8×300mm)；

柱温(25-35)℃；

流动相为甲酸-水(1:2500-7500)，流动相pH值为2-7；

流速0.25-0.75ml·min^-1。

检测器参数：飘移管温度85-100℃，气压0.1-0.2MPa；进样量10-40μL。

保留时间大于16min的均为小分子量物质，保留时间在16min内的为大分子物质。

本发明最优选的技术方案如下：

其中，样品的配制方法：

取1注射用益气复脉(冻干)用超纯水配制成浓度约为100mg·mL^-1的溶液，摇匀，经0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，进样20μL，

色谱条件：

色谱柱为Waters Ultrahydrogel^TM 250凝胶色谱柱(7.8×300mm)；

柱温30℃；

流动相为甲酸-水1:5000，流动相pH值为3；

流速0.5ml·min^-1。

检测器参数：飘移管温度90℃，气压0.17MPa；进样量20μL。