[发明专利]一种脂肪酶高产菌株、其筛选方法及用该菌株发酵生产脂肪酶的方法有效
申请号: | 201310204900.3 | 申请日: | 2013-05-28 |
公开(公告)号: | CN103275898A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 朱国萍;王宝娟;李全发;姚贺帮;晏蓉;马文杰;靳明明;曹正宇;王鹏;葛亚东 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12N9/20;C12R1/01 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵;冯琼 |
地址: | 241000*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪酶 高产 菌株 筛选 方法 发酵 生产 | ||
1.一种脂肪酶高产菌株,其特征在于,其保藏编号为CCTCC NO.M2013072。
2.一种如权利要求1所述的脂肪酶高产菌株的筛选方法,其特征在于,取石油或油污在橄榄油液体富集培养液中富集,稀释后涂布于丁酸筛选培养基培养后,挑取透明圈直径最大的菌落,经纯化即得。
3.根据权利要求2所述的筛选方法,其特征在于,1L所述橄榄油液体富集培养液中包括:(NH4)2SO4 1.0g、NaCl 0.5g、MgSO4 0.1g、K2HPO4 1g、橄榄油0.01L。
4.根据权利要求2所述的筛选方法,其特征在于,所述富集的次数为至少3次。
5.根据权利要求2所述的筛选方法,其特征在于,1L所述丁酸筛选培养基中包括:酵母提取物1.0g、(NH4)2SO4 1.0g、NaCl 0.5g、MgSO4 0.1g、K2HPO4 1g、琼脂0.15L、三丁酸甘油酯0.01L。
6.一种脂肪酶的发酵生产方法,其特征在于,包括如下步骤:
获得保藏编号为CCTCC NO.M2013072的脂肪酶高产菌株的种瓶培养物;
取所述保藏编号为CCTCC NO.M2013072的脂肪酶高产菌株的种瓶培养物接种于发酵培养基,培养、纯化即得。
7.根据权利要求6所述的发酵生产方法,其特征在于,所述培养的条件为在转速为180转/分钟的条件下、30℃培养48h。
8.根据权利要求6所述的发酵生产方法,其特征在于,以体积百分数计,所述接种的接种量为6%。
9.根据权利要求6所述的发酵生产方法,其特征在于,所述保藏编号为CCTCC NO.M2013072的脂肪酶高产菌株的种瓶培养物的制备方法包括如下步骤:
步骤1:取保藏编号为CCTCC NO.M2013072的脂肪酶高产菌株,接种于斜面培养基,于30℃培养18~24h,获得斜面菌种;
步骤2:取所述斜面菌种接入种子培养基中,在转速为180转/分钟的条件下于30℃培养14~18h,即得。
10.根据权利要求6所述的发酵生产方法,其特征在于,1L所述发酵培养基中包括:橄榄油10mL、蔗糖15g、蛋白胨10g、NaCl 10g。
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