[发明专利]从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法有效
申请号: | 201310194899.0 | 申请日: | 2013-05-21 |
公开(公告)号: | CN103289968A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 李海航;张屹峰;林佳;曾昭钦;程实;倪贺 | 申请(专利权)人: | 华南师范大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N9/24;C07K14/415;C07K1/30 |
代理公司: | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人: | 刘延喜 |
地址: | 510631 广东省广州市天河*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘薯 水溶性 提取 分离 制备 氧化酶 淀粉酶 储藏 蛋白 方法 | ||
1.一种从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于,其包括以下步骤:
(1)获取甘薯的水溶性提取液;
(2)将(1)中的所述提取液调节pH值至包括多酚氧化酶的等电点的范围,静置,分离沉淀和上清;
(3)所述(2)的沉淀用不超过获得该沉淀的甘薯鲜重的水或缓冲液溶解后,加入丙酮至丙酮终浓度为30%~60%,静置,分离沉淀和上清,其沉淀为甘薯的多酚氧化酶;
(4)所述(2)的上清加入丙酮至丙酮终浓度为30%~60%,静置,分离沉淀和上清,其沉淀为甘薯的β-淀粉酶;
(5)合并所述(3)和(4)的上清,加入丙酮至丙酮终浓度为70%~90%,静置,分离沉淀和上清,其沉淀为甘薯的储藏蛋白;
(6)将所述(3)至(5)得到的组分分别浓缩和干燥保存。
2.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(1)至(5)在4℃~室温下进行。
3.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述(1)的提取液为甘薯生产淀粉过程中产生的废水或浓缩液。
4.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于,所述(1)的提取液的制备方法包括以下步骤:
(a)将洗净的新鲜甘薯打碎至糜状;
(b)用所述(a)中甘薯鲜重一倍至数倍体积的自来水、饮用水、蒸馏水或缓冲液将所述(a)的糜状甘薯浸泡0.5小时;
(c)分离所述(b)中的沉淀和上清,其上清为甘薯的水溶性提取液。
5.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述(2)中的pH值调节至3.0~5.0;静置时间为0.5~1.0小时。
6.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(3)、(4)和(5)中的静置时间为1小时。
7.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(6)的干燥方法为真空冷冻干燥、真空干燥或喷雾干燥。
8.如权利要求1所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:还包括步骤(7),回收所述(5)中的上清的丙酮,得甘薯的小分子有机物,干燥后保存。
9.如权利要求8所述的从甘薯的水溶性提取液中分离和制备多酚氧化酶、β-淀粉酶和储藏蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(7)采用减压蒸馏回收丙酮。
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