[发明专利]以CD13为分子靶点、NGR为配体的放射性核素分子探针及其标记技术和应用

说明书

技术领域

本发明属于放射性核素标记技术领域，具体涉及一种以CD13为分子靶点，NGR为配体的放射性核素分子探针及其标记技术和作为显像剂在靶向恶性肿瘤新生血管及早期诊断和分期中的应用。

背景技术

氨基肽酶N（aminopeptidase N，APN，即CD13）是一种Zn^2＋依赖的膜结合外肽酶，能降解蛋白或多肽N末端的中性氨基酸。APN广泛存在于多种器官、组织和细胞，其除了具有酶的功能外，还具有抗原呈递功能，并作为数种人类病毒如冠状病毒的受体。在恶性肿瘤细胞生长方面，APN与多种恶性表型如细胞增值、迁移、入侵及新生血管形成密切相关。

Pasqualini等利用噬菌体展示技术研究归巢至实体肿瘤的特异性多肽，发现天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（asparagine-glycine-arginine，NGR）基序与新生血管内皮特异性结合。随后的研究发现，APN是NGR基序的主要受体，其仅在新生血管内皮表达，而在正常血管不表达。APN是内皮细胞形态和血管生成的重要调节因子：（1）应用APN抑制剂在动物模型中能明显破坏视网膜新生血管形成、绒毛尿囊膜新生血管形成及种植肿瘤的生长；（2）APN水平在缺氧、新生血管生长因子、毛细血管形成调节信号等刺激下出现上调改变；（3）在新生血管基因表达调节信号的调节下，含APN近端启动子序列的受体质粒的转录水平在体外及荷瘤模型中均明显增加；（4）APN的拮抗剂能干扰血管形成，但不影响血管内皮细胞的增殖，提示APN调控内皮细胞的形态形成。APN在血管内皮细胞选择性表达，包括人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、人主动脉内皮细胞（HAEC），而在大多数正常细胞和肿瘤细胞株检测不到，APN干扰RNA（RNAi）能抑制HUVEC基底膜毛细血管的形成。APN是肿瘤新生血管形成的主要调节因子，已经成为肿瘤诊断和治疗的重要靶点。

目前有针对APN的抗肿瘤药物已经进入临床应用，或处于临床（前）试验阶段，如Ubenimex、Tosedostat、TVT-DOX、NGR-TNF、tTF-NGR、Pt(IV)-NGR、CNF1/CNF2、Endo-NGR、DOX-CNGRC、J1、NGR-PM-DTX等，其中多数药物以NGR作为中介携带抗肿瘤药物靶向至肿瘤部位的。同样，APN作为NGR的特异性受体，在新生血管高水平表达，使得NGR介导的显像剂用于新生血管的成像成为可能。文献Synthesis and evaluation of 64Cu-labeled monomeric and dimeric NGR peptides for microPET imaging of CD13receptor expression.(Chen K,Ma W,Li G,,et al.Mol Pharm.2013Jan7;10(1):417-27)公开了一种⁶⁴Cu标记的耦合DOTA的NGR用于CD13受体PET成像，其中NGR为含NGR基序的环状的GGGCNGRC二聚体，具有如下结构：

然而⁶⁴Cu-DOTA-NGR1和⁶⁴Cu-DOTA-NGR2作为放射性核素分子探针生物分布不理想，肝脏的摄取很高，导致药物代谢很慢，靶器官肿瘤的摄取不好，不是理想的放射性核素分子探针无法应用于实际临床。目前针对APN的靶向显像研究明显滞后于治疗研究，而目前报道的少数显像剂远远不能满足今后临床的需求，这就需要不断开发新的显像剂。就核医学来讲，随着PET-CT的逐步普及，PET正电子药物的开发需求越来越多，而针对肿瘤新生血管APN的PET正电子药物目前尚未见报道。因此，开发理想的NGR介导的针对APN的正电子显像剂显得非常必要。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种以CD13为分子靶点，含NGR基序多肽为配体的放射性核素分子探针及其标记技术和作为显像剂在靶向恶性肿瘤新生血管及早期诊断和分期中的应用，本发明技术方案生物分布好，靶向性高，代谢快的放射性核素分子探针，标记方法简便实用，具有很高的应用价值。

本发明具体技术方案如下：