[发明专利]一种抗杂色曲霉素的单克隆抗体

权利要求书

1.一种抗杂色曲霉素单克隆抗体，包括轻链和重链，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示；所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。

2.权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测杂色曲霉素的试剂、药剂或试剂盒中的应用。

3.一种检测杂色曲霉素试剂盒包括：权利要求1所述的抗体、抗杂色曲霉素ASP1抗体，其中所述ASP1抗体其轻链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：3所示；所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：4所示。

4.根据权利要求3所述的检测杂色曲霉素试剂盒，其特征在于，所述的抗杂色曲霉素ASP1抗体带有生物标记或化学标记，所述生物标记或化学标记为荧光标记、放射性标记或酶标记。

5.根据权利要求3所述的检测杂色曲霉素试剂盒，其特征在于，所述的抗杂色曲霉素ASP1抗体为辣根过氧化酶标记。

6.权利要求5所述的检测杂色曲霉素试剂盒还包括：辣根过氧化物酶底物缓冲液、ST标准品(100ug/ml，0.1ml)、阴性对照样品BSA。

7.一种检测杂色曲霉素的方法，包括以下步骤：

a)将权利要求1所述的抗杂色曲霉素抗体，浓度为1mg/ml，用包被液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液)按1∶320稀释，取稀释后的抗体稀释液，加入酶标板中，每孔100μl，4℃过夜；

b)洗涤液(PH7.4PBS)清洗酶标板3次，每次在摇床上摇5-8min；

c)取100μl待测样品加入到包被的酶标板中，37℃孵育2h，每个样品包被2个孔，同时将标准品进行梯度稀释依次为5pg/ul、10pg/ul、15pg/ul、20pg/ul25pg/ul、30pg/ul，每孔100μl；

d)将辣根过氧化酶标记的抗体ASP1按1∶3000～1∶5000稀释，每孔100μl，37℃孵育2h。

e)再用洗涤液清洗5次，加辣根过氧化物酶底物缓冲液100μl，显色5min后，加入终止液100μl，终止显色；

f)用酶标仪检测OD450的值，依据标准品的吸光值制备标准曲线，从而根据吸光值判断所测样品中ST的浓度。