[发明专利]10种常见致病军团菌的基因分型芯片及检测用试剂盒

权利要求书

1. 一种检测多种致病军团菌的基因芯片，包括固相载体和固定在该固相载体上的寡聚核苷酸探针，其特征在于该寡聚核苷酸探针包含下述DNA片段中的至少一种：

（1）嗜肺军团菌，安氏军团菌，博滋曼军团菌，杜莫夫军团菌，费菲军团菌，戈尔曼军团菌，乔丹河军团菌，长滩军团菌，米氏军团菌，迈氏军团菌等10种军团菌的16s-23s间区序列（ITS）中所选取的至少一种DNA片段；

（2）（1）中选取的DNA片段的互补DNA片段；

上述所述的固相载体为带有活性基团的玻璃片。

2.权利要求1所述的基因芯片，其中所述寡聚核苷酸探针具有SEQ ID NO:1-29所示的核苷酸序列，或不同于SEQ ID NO:1-29但编码的氨基酸序列与SEQ ID NO:1-29所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列。

3.权利要求1或2所述的基因芯片，其中还包括正对照探针；具有SEQ ID NO:30所示的核苷酸序列。

4.权利要求1所述的基因芯片在制备检测嗜肺军团菌，安氏军团菌，博滋曼军团菌，杜莫夫军团菌，费菲军团菌，戈尔曼军团菌，乔丹河军团菌，长滩军团菌，米氏军团菌，迈氏军团菌10种军团菌中至少一种致病菌的方面应用。

5.权利要求1所述基因芯片的使用方法，其特征在于包含步骤：

（1）根据权利要求1所述病原菌的16s-23s间区序列（ITS）设计并合成用于PCR扩增的引物；

（2）制备待测样品的基因组DNA，使用步骤（1）中的引物，对待测样品基因组DNA进行PCR扩增，得到靶序列；

（3）标记步骤（2）中得到的靶序列；

（4）将标记后的靶序列与权利要求1所述的基因芯片杂交；

（5）用生物芯片扫描仪获取杂交信号并分析杂交结果。

6.权利要求5所述的方法，其特征在于步骤（1）中所述的引物包括SEQ ID NO:31-32所示的核苷酸序列的至少一种。

7.一种检测嗜肺军团菌的试剂盒，其特征在于包含权利要求2所述SEQ ID NO:1-29所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列的至少一种。

8.权利要求7所述的试剂盒，其特征在于还包含PCR扩增的引物，该引物具有SEQ ID NO: 31-32的核苷酸序列的至少一种。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于还包含杂交盒、杂交液。

10.权利要求7所述的试剂盒在制备检测嗜肺军团菌，安氏军团菌，博滋曼军团菌，杜莫夫军团菌，费菲军团菌，戈尔曼军团菌，乔丹河军团菌，长滩军团菌，米氏军团菌，迈氏军团菌10种军团菌的中至少一种致病菌方面的应用。