[发明专利]介导应激反应的肽抑制剂

说明书

本申请是申请日为2005年8月23日，申请号为“200580028458.7”，发明名称为“介导应激反应的肽抑制剂”的申请的分案申请。 

发明领域

本发明涉及由单克隆抗DNA抗体识别的肽，所述肽能够抑制真核细胞中的细胞应激反应和免疫应激反应，从而可用于治疗人变性性疾病和炎症。 

发明背景 

细胞凋亡

细胞凋亡，或程序性细胞死亡，对于正常生物过程包括组织胚胎发生、组织稳态的维持、多细胞生物体的细胞发育、病毒感染细胞的消除及免疫系统的发育(Ellis等，1991)具有根本的重要性。这是与变性性死亡或坏死根本不同的细胞死亡类型，因为此细胞死亡类型是基因介导的细胞自毁的主动过程，在某些情况下，具有生物意义的稳态功能。 

p53

p53蛋白最初被鉴定为肿瘤相关抗原，是肿瘤抑制基因的产物，其可以抑制突变或异常细胞的生长(Baker等，1990)。认为功能性p53可以检测出DNA损伤(Lee等，1995)及随后诱导异常细胞的DNA修复(Kastan等，1991)、生长停滞(Kuerbitz等，1992)或细胞凋亡(Yonish-Rouach等，1991)。具体地，p53通过消除细胞群的遗传损伤细胞而调节基因组稳定性，且其主要功能之一为预防肿瘤形成。 

p53蛋白具有至少两个DNA结合位点： 

(1)p53蛋白的核心，其与p53反应基因的启动子区中的DNA序列特异性相互作用(el-Deiry等，1992)；及 

(2)p53蛋白的C末端，其通常可识别损伤DNA的常见特征(Lee等，1995；Foord等，1991)。 

p53蛋白是一种转录因子，其可特异性结合p53依赖性基因调节序列的共有位点(el-Deiry等，1992)。在与结合特定DNA调节位点有关的主要序列编码结构域中p53基因的突变导致肿瘤抑制减少。因此，不足为奇，大部分天然的人肿瘤带有突变的p53(Hollstein等，1991)。 

p53具有短的半衰期，并因此，在细胞中持续合成和降解。然而，当细胞经受应激时，p53被稳定。诱导p53稳定的细胞应激的例子如下： 

a)DNA损伤，例如由UV(紫外线)辐射、细胞突变、化疗、及放疗引起的损伤； 

b)体温过高； 

c)缺氧；及 

d)某些化疗药物引起的微管脱调节，如使用紫杉醇或长春花碱类的治疗。 

应激活化的p53诱导级联事件，导致应激细胞的生长停滞或细胞凋亡，从而防止异常细胞的过度生长和肿瘤形成(Ko，1996)。然而，严重应激之后p53的过度活化对生物体有害，这是因为组织功能可被过度的细胞凋亡损害(Komarova，2001)。 

具体地，放疗和化疗显示有严重的副作用，例如对淋巴和造血系统及肠上皮的严重损伤，限制了这些治疗的效果。其他副作用，如脱发，也是由p53介导并进一步减弱癌症治疗的效果。因此，为消除或减轻在正常组织中与癌症治疗相关的不良副作用，在p53缺陷的肿瘤的治疗过程中抑制正常组织中p53的活性并由此保护正常组织是有益的。 

已认为p53的失活是非期望和不需要的事件，且已付出可观的努力通过恢复p53功能而促进癌症治疗。然而，p53恢复或模拟会引起上述在化疗或放疗过程中损伤正常组织细胞有关的问题。在癌症治疗过程中，这些正常细胞经受应激，使细胞中的p53引起程序性死亡。癌症治疗然后杀死肿瘤细胞和正常细胞。 

美国专利No.6,593,353揭露了p53抑制剂用于p53介导的疾病、病症及损伤的治疗。 

美国专利No.6,420,136揭露了通过添加一种增强或抑制p53的生物化学活性的蛋白质而调节细胞中p53蛋白的活性的方法。 

美国专利No.6,630,584揭露了一种可识别暴露于突变体而非野生型p53上的抗原表位的单链抗体，和编码所述单链Fv的DNA分子，含有所述抗体的药物组合物，以及使用所述药物组合物的治疗方法。 

p53和应激相关的反应