[发明专利]一种检测活细胞内环二鸟苷酸含量的报告系统及其应用无效
申请号: | 201310078510.6 | 申请日: | 2013-03-12 |
公开(公告)号: | CN103173547A | 公开(公告)日: | 2013-06-26 |
发明(设计)人: | 高海春;张海燕 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/02;C12N15/63 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 细胞 内环 二鸟苷酸 含量 报告 系统 及其 应用 | ||
1.一种检测活细胞内环二鸟苷酸含量的报告系统,其特征在于,该报告系统由依次连接的启动子、核糖开关、SD序列和报告基因组成。
2.如权利要求1所述的报告系统,其特征在于,所述的启动子为SO-1072基因的强启动子区域,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
3.如权利要求1所述的报告系统,其特征在于,核糖开关的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.如权利要求1所述的报告系统,其特征在于,所述的报告基因为Lac Z基因、荧光素酶基因或荧光蛋白基因。
5.如权利要求4所述的报告系统,其特征在于,所述的报告基因为Lac Z基因。
6.含有如权利要求1~5任一所述的报告系统的重组载体。
7.含有如权利要求1~5任一所述的报告系统的表达系统。
8.如权利要求1~5任一所述的报告系统在检测活细胞内环二鸟苷酸含量中的应用,包括:
将所述的报告系统转入待测细胞,将重组细胞置于培养液中培养,至培养液OD600值为0.4-0.6,测定重组细胞中报告基因的表达量,根据以下公式计算待测细胞内环二鸟苷酸的含量:
环二鸟苷酸含量=-1072ln(miller unit-CK)+793.35;
其中,miller unit为重组细胞中报告基因的表达量;CK为待测细胞中报告基因的本底水平表达量。
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