[发明专利]一种金霉素固体废弃物的无害化处理方法

权利要求书

1.一种金霉素固体废弃物的无害化处理方法，其特征在于，通过如下操作步骤实现：

(1)降解菌株选用与活化培养

根据金霉素新鲜菌渣特点，选用对金霉素具有降解能力、且能耐受强酸性和高浓度金霉素的菌株，菌株活化使用马丁氏培养基或马铃薯葡萄糖培养基，

活化条件为：温度28-30℃，150-180r/min震荡培养24-48h，然后转接到更大容器中继续培养，如此操作2-4代。

(2)菌渣原料预处理

金霉素新鲜菌渣外形呈不规则的大块颗粒状，生物处理前，需将菌渣进行破碎处理，然后，可根据需要对破碎后菌渣进行高温或不经过高温处理。

(3)辅料选择与预处理

选择农副产品作辅料，121℃灭菌20-30min。

(4)原辅材料混合

以破碎处理后的金霉素新鲜菌渣为主要原料，添加少量预处理后的辅料共同组成发酵底物。

(5)接种与发酵处理

将活化后的菌种1种或多种接种到菌渣发酵底物中，搅拌均匀，然后放入发酵设备中进行发酵处理，定期测定金霉素残留量、pH值以及水分等指标。

(6)菌渣的生物毒性测定

采用生物指示法测定菌渣毒性，以微生物作为毒性测试菌，通过比浊法测定菌渣毒性，具体操作为：在III号培养基中，加入用磷酸盐缓冲液提取的菌渣提取液，并以添加相同量的磷酸盐缓冲提取液做对照(CK)，然后分别加入测试菌，在28-35℃的摇床中培养，定期取样测定培养液的吸光值(OD₆₀₀)，并计算抑制率：

抑制率(％)＝(对照OD₆₀₀-处理OD₆₀₀)/对照OD₆₀₀×100

经测定得知，添加浓度为0.1-30.0mg/ml的原菌渣提取液，培养16h，各浓度对测试菌生长的抑制率均在80％以上，而添加0.1-30.0mg/ml发酵处理后菌渣的提取液，培养16h，对测试菌的生长没有抑制作用。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)所述金霉素新鲜菌渣的初始pH值为2.0-3.0，金霉素含量为0.5-2.5％(占干基)，含水量为60-80％。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)所述金霉素降解微生物包括哈茨木霉(Hypocrea lixii)，草酸青霉(Penicillium oxalicum)，桔青霉(Penicillium citrinum)和小刺青霉(Penicillium spinulosu)等菌种，以桔青霉LJ318、哈刺木霉LJ245，草酸青霉LJ302和小刺青霉LJ220作为优选菌株，这些菌株均已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，菌种活化培养基：

马丁氏培养基配方：蛋白胨6.0g，葡萄糖10.0g，KH₂PO₄1.0g，MgSO₄·7H₂O0.5g，溶于1000ml蒸馏水中。

马铃薯葡萄糖培养基配制：将马铃薯洗净去皮，称取200g切成小块，加水1000ml，煮沸20-30分钟，用纱布过滤，加入20g葡萄糖，补足水分至1000ml。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(2)所述菌渣预处理方法中的破碎处理后的颗粒大小为1-5mm，菌渣高温处理为121℃，20-30min。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(3)所述农副产品辅料，主要指麦片、麸皮、糠皮、木屑、秸秆等。

6.如权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(4)所述原辅材料混合，是指以金霉素菌渣为主要原料，占比例为87.5-95.0％(按湿基量计算)，辅料占比例5.0-12.5％，辅料种类可选择1-3种。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(5)所述接种与发酵处理，接种量为2-15％，发酵温度为18-35℃，优选28-30℃，相对湿度为90-95％。发酵期间要进行搅拌或通空气处理。

8.根据权利1要求所述方法，其特征在于，金霉素含量测定采用高效液相色谱法，pH值测定采用酸度计测定。