[发明专利]一种花茶抗氧化性检测新方法

说明书

技术领域

本发明属于纳米生物分析技术领域，特别涉及一种基于金纳米颗粒的生长检测花茶中抗氧化物总量的方法。

背景技术

纳米技术与生物技术的融合，使纳米生物技术获得了很多重要的进展。纳米技术的应用已涉及愈来愈多的领域，生物科技，食品，纳米检测技术已成为研究热点。金纳米颗粒作为研究较早的一种纳米材料，在生物检测中的应用逐渐引起世人的重视。金纳米颗粒具有特殊的物理化学性质，对于提高生物检测的灵敏度和稳定性具有重大意义。近年来，金纳米颗粒在食品检测方面的应用也引起了人们的关注。

目前食品检测分析一般采用化学分析法(CA)、薄层层析法(TLC)、气象色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)，但需要繁琐、耗时的前处理，样品耗损较大。较之于灵敏度较低的CA和TLC方法，GC、HPLC的灵敏度相对较高，但操作技术要求高、仪器设备昂贵，并不适合现场快速测定和普及，而以金纳米材料为免疫标记物的检测技术止弥补了这些技术的缺点，迎合现代检测的要求，在现代食品分析检测中的运用也越来越多。

现有的测定抗氧化活性的方法有FRAP法、二甲基亚砜法、水杨酸法、TRAP法、DPPH法、ORAC法、次甲基蓝分光光度法。这些检测方法有着白身的优势但也存在着不足，在这些方法的基础上，采用纳米技术检测花茶的抗氧化性，能够对花茶样品中所含的抗氧化物质的总量进行定量分析。

目前为止，尚未有使用纳米材料检测花茶抗氧化性并定量样品中抗氧化物质总量的技术。

发明内容

1、发明目的

本发明目的足提供一种操作简便且检测灵敏度高的基于金纳米颗粒生长检测花茶的抗氧化性强弱并实现抗氧化物质定量的方法。

2、技术方案

本发明所述的测定花茶抗氧化能力强弱的方法，即利用金纳米颗粒在不同浓度的没食子酸中生长时光谱的变化作为标准参照体系，根据金纳米颗粒在花茶提取液中的生长过程中光谱的变化，评价和测定花茶的抗氧化能力。

本发明所述的测定花茶抗氧化能力的方法，即：

在K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液条件下，没食子酸介导金纳米颗粒生长。金纳米颗粒在不同浓度的抗氧化剂存在下进行生长。

利用在不同浓度的没食子酸溶液中生长的金纳米颗粒的光谱性质的变化来计算抗氧化剂抗氧化能力的强弱。绘制标准曲线。

用花茶萃取液替换没食子酸溶液介导金纳米颗粒的生长，观察其光谱性质的变化计算花茶样品的抗氧化能力，换算成花茶所含抗氧化物质的没食子酸当量。

本发明具体采用如下技术方案来解决所提出的问题：

一种基于金纳米颗粒的抗氧化剂对花茶的抗氧化能力的测定方法，步骤为：

1.K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液的制备：将100mg的K₂CO₃溶于200mL纯水中，搅拌10min，再加入3ml的1％的HAuCl₄到反应溶液中，继续搅拌30min，溶液由淡黄色慢慢变成无色透明。将该溶液置于4℃冰箱中保存。

2.金种子(AuNPs)的制备：向200mL4℃的预冷纯水中加入3mL1％HAuCl₄，搅拌，再加入1mL K₂CO₃(0.2mol·L-1)，最后快速加入9mL NaBH₄(0.5mg·mL-1)，搅拌5min。将得到的酒红色的AuNPs溶液置于4℃保存备用。

3.取6mL K₂CO₃-HAuCl₄混合溶液于反应瓶中，置于磁力搅拌器上，均速搅拌，加入100μL的AuNPs，迅速加入600μL超纯水，搅拌10分钟后，检测其紫外吸收峰的位置以及吸收强度，并记录。以上作为空白对照。重复上述步骤，将600μL超纯水分别变为浓度为0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.08mg/mL、0.06mg/mL、0.04mg/mL、0.02mg/mL、0.008mg/mL、0.006mg/mL、0.004mg/mL的没食子酸溶液。并绘制标准曲线。

4.花茶样品检测时，重复步骤3，将600μL没食子酸溶液置换成等量的样品萃取液，检测后的数值带入步骤3所得的标准曲线线性关系，得出花茶所含抗氧化物质的浓度，通过公式计算出该样品中抗氧化物质的没食子酸当量。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：