[发明专利]甘丙肽在制备女性抑郁症检测工具中的应用有效
申请号: | 201310059245.7 | 申请日: | 2013-02-26 |
公开(公告)号: | CN103175973A | 公开(公告)日: | 2013-06-26 |
发明(设计)人: | 李慧;徐志卿;王传跃;王永军;杨予涛 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74 |
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地址: | 100069 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘丙肽 制备 女性 抑郁症 检测工具 中的 应用 | ||
1.甘丙肽在制备检测女性抑郁症的试剂盒中的应用。
2.一种检测女性抑郁症的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含Galanin的抗体。
3.一种检测女性抑郁症的放免试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括以下组份:含Galanin抗体的大鼠血清、125I-Galanin、缓冲液、分离剂、正常大鼠血清、Galanin标准品为5、10、20、40、80、160pg/mL;所述缓冲液为200mM pH5.0磷酸盐缓冲液;所述分离剂为兔抗大鼠IgG血清。
4.根据权利要求2或3中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述的抗体为单克隆抗体。
5.根据权利要求2或3中任意一项所述的试剂盒,其特征在于,所述的抗体为多克隆抗体。
6.根据权利要求2或3中任意一项所述的试剂盒,所述单克隆抗体是通过杂交瘤的方法制备。
7.一种检测甘丙肽的方法,包括以下步骤:
1)测定前使样本置于室温或冷水中复融,再3000转/分离心5分钟,取上清液测定;
2)取聚苯乙烯试管编号,T、NSB,S0~S6和待测样品管等;
3)其中编号为NSB管加缓冲液300ul,编号为S0管加缓冲液200μl和含Galanin抗体的大鼠血清100μl;编号为S1~S6管先加100μl缓冲液和100μl含Galanin抗体的大鼠血清,然后分别加入100μl浓度为5、10、20、40、80、160pg/mL的Galanin标准品;样品管加入200ul待测样本上清和100μl含Galanin抗体的大鼠血清;上述各管加样完成后充分混匀,于4℃,放置24小时;
4)上述各管加入100ul125I-Galanin充分混匀,于4℃,放置24小时;
5)上述各管加入100ul正常大鼠血清,充分混匀后,室温静置20分钟。
6)除标记为T的试管,其他各管加入500ul兔抗大鼠IgG血清,混匀,室温放置20分钟,4℃离心3500转/分,25分钟,立即吸取上清液,测定各管沉淀cpm数。
7)实验结果处理如下:
(1)测每份标品管的cpm值并计算出平均数;
(2)按下列式计算各标准管,质控和病人标本的B/130%
B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×100%
B=为样品管值cpm,B0=标准管B0的cpm值;NSB=非特异性结合管的cpm值;
(3)以各标准管B/130为纵轴,标准物浓度(ng/ml)为横轴在logit-log坐标纸上绘制标准曲线;
(4)在标准曲线上查出质控血清及各标本的甘丙肽浓度。
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