[发明专利]作为疾病指标的免疫球蛋白裂解片段与用于检测和结合所述片段的组合物

说明书

本申请是申请日为2008年8月4日，申请号为200880102840.1(PCT/US2008/072083)，发明名称为“作为疾病指标的免疫球蛋白裂解片段与用于检测和结合所述片段的组合物”的发明专利申请的分案申请。

背景技术

技术领域

本发明涉及诊断和预后指标以及用于检测它们的方法和试剂。本发明还涉及监测患者疾病自然史的方法。

相关领域描述

在医学上，生物标记是可用于检测疾病进展或治疗效果的生物化学物质，也就是，诊断或预后指标。一种有效反映疾病自然史和疾病控制的生物标记是用于反映糖尿病患者的血糖控制的血红蛋白A1c。由于血红蛋白A1c(HbA1c)在血清中的半衰期长，它用作血糖自理想水平偏移和这种偏移的持续时间的最近记录。当前使用的全身炎性病症的生物标记是C反应性蛋白(CRP)(Pepys MB等人，J.Clin.Invest.111；1805-1812，2003)。CRP是一种响应许多种急性炎性病症而产生的急性期反应物。CRP响应细胞因子信号而在肝脏中合成，所述信号包括TNF和IL-6，它们自身从远方的炎症部位迁移而来。血清中CRP增加发生于感染、中风、血管疾病、心肌梗塞以及几种其他急性炎性疾患。

循环免疫球蛋白，特别是IgG类的那些抗体，是主要的血清蛋白。公知的是，人蛋白酶与炎性疾病、增殖性疾病、转移性疾病以及感染性疾病有关。如细菌蛋白酶如谷氨酰基内肽酶(金黄色葡萄球菌(Staph.aureus)或链球菌(化脓性链球菌(Strep.pyogenes))的免疫球蛋白降解酶那样，人蛋白酶诸如基质金属蛋白酶(MMP)和嗜中性粒细胞弹性蛋白酶在各蛋白酶特有的残基处裂解gG重链多肽。重链的裂解位点聚集在被称为铰链结构域的区域周围，两条重链链间二硫键出现在该区域中。铰链以下的区域构成Fc区，包含负责IgG的效应子功能的结合位点。在微生物的情况中，蛋白酶表达是潜在的附属致病途径，允许生物体避免调理作用(Rooijakkers等人，Microbes and Infection7：476-484，2005)，以致铰链下游由裂解导致的Fc结构域的蛋白酶解释放有效地中和会否则导致病理细胞的靶向和杀伤的功能。因此，特异性蛋白酶的活动可以代表无数疾病状态，包括癌症、炎性疾病以及感染性疾病。

在体内病理环境中，IgG裂解增强，这通过结合裂解的铰链结构域的天然IgG自身抗体的存在得以证明(Knight等人，1995；Nasu等人，1980；Persselin和Stevens，1985，Terness等人，1995J Imunol.154：6446-6452)。这些自身抗体还结合由几种蛋白酶(包括木瓜蛋白酶和胃蛋白酶)产生的Fab和F(ab’)₂片段，对于作为F(ab’)2分子的C末端残基剩余的下游铰链结构域具有特别强的反应性(Terness等人，1995)。已有报道检测到实际裂解产物(Fick等人，1985；Goldberg和Whitehouse.1970；Waller，1974)，但尚未开发出能使这些片段作为生物标记的强力测定方法，这可能是由于各片段被快速清除导致血清中浓度低，或由于在血液和组织中的大量完整免疫球蛋白当中检测所述片段的技术问题。过去制备了特异性抗体(Eckle等人，1988.Adv.Exp.Med.Biol.240：531-534)，用于检测人嗜中性粒细胞弹性蛋白水解裂解的Fc结构域，在类风湿性关节炎患者的滑液中直接检测到0.62ug/ml的中位浓度的Fc，但在患有其他类型的关节疾病的患者的滑液中没有检测到。

因此，若能够评估受试者的体液或血液中的IgG裂解产物的类型和数量，这可用作特定疾病活动的生物标记。用于这些测定的特定试剂和方法将可提供用于诊断性和预后性医学测定的有用工具。

发明内容

本发明涉及用于检测与蛋白酶活动有关的疾病过程的试剂以及所述试剂的该用途，所述蛋白酶是疾病病理的表现，并且是限制宿主免疫防御的因子。在本发明的一方面，涉及所述试剂和所述试剂在检测抗疾病抗体的测定方法中的用途，所述抗体对于与疾病病理相关的靶标具有特异性。所述试剂用于评价所述蛋白水解裂解导致的IgG分解产物。