[发明专利]作为疾病指标的免疫球蛋白裂解片段与用于检测和结合所述片段的组合物

权利要求书

1. 一种抗体组合物，其包含至少一种特异性结合IgG蛋白酶裂解产物的抗体，所述裂解产物的特征在于：a) 在非变性条件下具有与完整哺乳动物IgG相当的分子量，和b) 在变性但非还原条件下可分离成两个片段，包括135 kDa的抗原结合片段和含有CH2的片段，以及c) 其中，所述试剂不与完整IgG反应。

2. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其包含多克隆抗血清。

3. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其包含至少一种单克隆抗体。

4. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其特异性结合人IgG1中由选自以下的蛋白酶产生的蛋白酶特异性裂解位点：MMP-3、MMP-7、MMP-12、HNE、纤溶酶、组织蛋白酶G、胃蛋白酶、IdeS或来自金黄色葡萄球菌的谷氨酰基内肽酶I。

5. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其包含通过用多肽来免疫动物或筛选抗体文库而产生的抗体，所述多肽包括通过如下步骤制备的裂解产物类似物肽：

a) 鉴定抗体重链的被蛋白酶所裂解的一对残基的N末端残基；

b) 鉴定包含至少5个位于蛋白酶裂解位点上游的连续氨基酸残基的肽序列，其中所述蛋白酶裂解位点的N末端残基将变成所确定的序列的C末端；以及

c) 制备用于所述免疫或筛选的足够量的肽溶液。

6. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其含有至少一种特异性结合这样的多肽的抗体，所述多肽包含选自SEQ ID NO：1、2、3或4的人IgG铰链区序列的至少5个连续的氨基酸，所述序列位于蛋白酶裂解位点的氨基末端一侧的上游。

7. 根据权利要求6所述的抗体组合物，其中所述多肽包含至少IgG1的铰链核心，所述铰链核心被定义为残基-T-C-P-P-C-（SEQ ID NO: 1的残基7-11）。

8. 根据权利要求6所述的抗体组合物，其中所述肽是人IgG1下游铰链和邻接的CH2结构域的12-mer肽类似物，其具有序列TCPPCPAPELLG（SEQ ID NO：1的残基7-18）。

9. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其特异性结合裂解产物肽类似物，所述类似物包括具有选自SEQ ID NO：8-11的氨基酸序列的肽及其N末端截短形式，包括至少5个氨基酸和含有位于IgG蛋白酶裂解位点的N末端一侧的上游的氨基酸序列。

10. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其特异性结合具有选自SEQ ID NO：8-11的氨基酸序列的多肽。

11. 根据权利要求1所述的抗体组合物，其特异性结合具有选自如下的氨基酸序列的多肽：(a) 包含位于IgG1 MMP-3裂解位点的氨基末端一侧氨基酸序列的肽 (TCPPCPAP，SEQ ID NO：1的残基7-14)；(b) 或包含谷氨酰基内肽酶IgG1裂解位点的肽(TCPPCPAPE，SEQ ID NO：1的残基7-15)；或(c)包含IdeS IgG1裂解位点的肽(TCPPCPAPELLG，SEQ ID NO：1的残基7-18)。

12. 一种人IgG蛋白酶裂解位点肽类似物，其由选自SEQ ID NO：8-11的氨基酸序列组成。

13. 根据权利要求12所述的肽，其通过N末端与匙孔                                               血蓝蛋白(KLH)共价连接。

14. 一种用根据权利要求12所述的肽类似物免疫的动物。

15. 根据权利要求14所述的动物，其中所述动物是家兔。

16. 一种使用根据权利要求15所述的被免疫动物制备根据权利要求1所述的抗体组合物的方法，其中，通过在人IgG亲和基质上预吸附而从所述动物血清纯化所述试剂。

17. 一种通过分析受试者的组织样品来检测所述受试者的疾病过程的方法，其中所述方法包括检测蛋白水解裂解的IgG，所述裂解的IgG的特征在于，a)在生理条件下具有与完整哺乳动物IgG相当的分子量，和b)在变性但非还原条件下可分离成两个片段，包括135 kDa的抗原结合片段和25 kDa的片段。