[发明专利]一种抗恶性淋巴瘤融合蛋白及其制备方法有效
| 申请号： | 201310033925.1 | 申请日： | 2013-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN103172748A | 公开（公告）日： | 2013-06-26 |
| 发明（设计）人： | 何凤田;张立;杨朝辉 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K38/17;A61K47/48;A61P35/00 |
| 代理公司： | 重庆志合专利事务所 50210 | 代理人： | 胡荣珲 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 恶性 淋巴瘤 融合 蛋白 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗恶性淋巴瘤融合蛋白，其特征在于，包含人激活蛋白-1的抑制剂SARI和人B细胞激活因子BAFF的突变蛋白msBAFF，其中msBAFF是人B细胞激活因子BAFF的217-224位氨基酸被2个甘氨酸取代后的突变体。
2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述人激活蛋白-1的抑制剂SARI和突变蛋白msBAFF之间连接有TAT蛋白转导结构域多肽TAT-PTD。
3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述TAT蛋白转导结构域多肽TAT-PTD的编码序列如SEQ ID NO:6所示。
4.如权利要求1至3任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
5.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的编码序列如SEQ ID NO:2所示。
6.如权利要求1所述的融合蛋白的制备方法，其特征在于，包含步骤：
1）提取人外周血单核细胞的总RNA并将其反转录为cDNA；
2）以步骤1）中的cDNA为模板，使用SEQ ID NO:3-4所示的核苷酸序列为引物扩增人激活蛋白-1的抑制剂SARI的cDNA；
3）将以步骤2）所得的人激活蛋白-1的抑制剂SARI的cDNA及含有人B细胞激活因子BAFF的突变蛋白msBAFF的基因片段的载体酶切后连接，构建含所述人激活蛋白-1的抑制剂SARI基因片段和所述突变蛋白msBAFF的基因片段的重组质粒；
其中msBAFF是人B细胞激活因子BAFF的217-224位氨基酸被2个甘氨酸取代后的突变体；
4）将步骤3）获得的重组质粒转化大肠杆菌，诱导表达获得所述重组融合蛋白。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤3）所述含有人B细胞激活因子BAFF的突变蛋白msBAFF的基因片段的载体为pET28a-G4S-9R-G4S-mBAFF，其中G4S为4个甘氨酸和一个丝氨酸组成的柔性接头，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；9R为TAT蛋白转导结构域多肽TAT-PTD。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述TAT蛋白转导结构域多肽TAT-PTD的编码序列如SEQ ID NO:6所示。
9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤4）所述大肠杆菌为BL21Rossetta菌株。
10.权利要求1所述的融合蛋白在制备抗恶性肿瘤制剂中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军第三军医大学，未经中国人民解放军第三军医大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310033925.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
