[发明专利]一种含有重组人促红素的药物组合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种含有重组人促红细胞生成素的药物组合物及其制备方法。

背景技术

促红细胞生成素(Erythropoietin，EPO)简称促红素，是为分子量6-7万的糖蛋白，是一种促进红系造血前体细胞分化、繁殖的细胞因子，其能促使未分化的干细胞分化成红细胞系干细胞(erythropoietin responsive cell)。对进一步再成熟为成红血细胞、网织红细胞，血红蛋白的合成以及流入末梢血管等均有促进作用。一般在贫血和低氧状态时，根据身体组织对氧的需要，促红细胞生成素的供给量将增加，但在肾脏贫血时其含量则非常低。在临床上，促红细胞生成素主要用于增加红血球的数目，用于贫血、组织断离、早产儿，用在癌学和血液学方面。

1983年由Lin等成功分离并克隆了EPO基因，1985年利用基因工程技术开始大批量生产重组人促红细胞生成(rHuEPO)并开始用于临床实验，美国食品药品管理局(FDA)于1989年正式批准rHuEPO应用于贫血的临床治疗。

rHuEPO在水溶液中稳定性差，所以rHuEPO在溶液中需要加入保护剂以增加其稳定性，并防止器被吸附在容器的内壁上。CN1247257C公开了一种充足人促红细胞生成素制剂，其包括甘露醇、L-组氨酸盐酸盐、金属离子螯合剂、pH值缓冲液、氯化钠等试剂。CN100502943C公开了一种重组人促红细胞生成素的药物注射剂，其包括pH值缓冲液、聚山梨酯80及聚山梨酯20、氯化钠以及等成分。这两篇文献认为使用人血白蛋白存在潜在的血源污染以及药物过敏等问题。然而，使用金属离子螯合剂可能会引起低血钙等问题，而使用聚山梨酯80则会导致胶态离子形成，一些rHuEPO分子聚集到这些胶态离子的表面，进入机体后可激发机体免疫系统，最终导致抗体产生(Schellekens等)，从而引起抗体介导的纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)。

研究表明rHuEPO易受保存及运输过程中温度过高的影响，其结构中冷链变性可能是诱发抗体产生的关键。另外，在运输过程中极易导致rHuEPO的失活。目前为止还没有有效的解决方法。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中重组人促红素稳定性较差的问题，提供一种稳定性更好的含有促红细胞生成素的药物组合物。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种含有重组人促红素的药物组合物，其包括以下组分：

甘露醇                    0.5～10％(W/V)；

磷酸氢二钠-枸橼酸缓冲液   10～100mM，pH5.5～7.5；

重组人血白蛋白            0.001～0.1％；

有效量重组人促红素。

优选，本发明药物组合物包括以下组分：

甘露醇                    5％(W/V)；

磷酸二氢钠-枸橼酸缓冲液   25mM，pH6.5；

重组人血白蛋白            0.01％；

有效量重组人促红素。

上述有效量的重组人促红素可以是在临床上直接使用的浓度，或者其浓缩品，例如可以是200～30000IU/ml，优选500～20000IU/ml。

本发明药物组合物可以是水针剂，也可以制成冻干粉，优选为水针剂。

本发明还提供制备上述药物组合物的方法，其是将磷酸氢二钠-枸橼酸缓冲液、甘露醇、重组人血白蛋白、重组人促红素加入注射用水溶解，并定容。所述定容后还包括除菌和灌装的步骤。所述除菌的方法优选采用过滤除菌法，依次使用0.45μm和0.22μm的滤膜过滤除菌。在灌装时在瓶中填充氮气，并压塞轧盖。

本发明采用重组人血白蛋白和甘露醇作为保护剂，可以有效提高其稳定性，并且有效阻止其在注射器或者容器壁吸附，同时在本发明pH值以及特定的缓冲条件下，能够有效减缓在常温下蛋白质的失活，从而使得本发明注射液更容易保存和运输。有意思的是，单独使用甘露醇或者人血白蛋白作为稳定剂则其在常温下的保存效果远不如本发明注射液的保存效果。

本发明中的人血白蛋白使用的重组人血白蛋白，因而不存在血源污染的风险问题，而本发明中的人血白蛋白用量极低，仅为人血白蛋白注射用的万分之一，从而极大地降低了部分人群对人血白蛋白过敏的风险。

具体实施方式

以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。

实施例1