[发明专利]B细胞淋巴瘤的治疗

说明书

背景

本发明涉及通过操纵eIF-5A1表达治疗B细胞淋巴瘤的方法。先前已经讨论了包含靶向针对eIF-5A1基因来抑制对象中该基因的内源表达的siRNA，和编码能够在对象中表达的突变的eIF-5A1的多核苷酸的组合物用于治疗多发性骨髓瘤的用途(参见US 20100076062和20100004314)。

发明概述

本发明涉及通过组合表达质粒施用siRNA治疗B细胞淋巴瘤，所述siRNA阻断内源型eIF-5A1表达，所述表达质粒提供在对象中不能被羟丁赖氨酸化（hypusinated）的eIF-5A1的表达。

本发明进一步提供通过组合硼替佐米或来那度胺共施用siRNA和表达质粒治疗多发性骨髓瘤，所述siRNA阻断内源型eIF-5A1表达，所述表达质粒提供不能被羟丁赖氨酸化的eIF-5A1的表达。

附图简述

图1：具有DLBCL肿瘤的小鼠中的SNS01-T剂量反应曲线。

图2：具有DLBCL肿瘤的小鼠中的SNS01-T剂量反应曲线。

图3：具有DLBCL肿瘤的小鼠中的具有截短的eIF5A的SNS01-T的剂量反应曲线。

图4：施用SNS01-T后小鼠体重。

图5：具有套细胞淋巴瘤肿瘤的小鼠中的SNS01-T剂量反应曲线。

图6：组合来那度胺的套细胞淋巴瘤肿瘤的SNS01-T治疗。

图7：SNS01-T eIF-5A表达质粒(SEQ ID NO: 13)的图谱。

发明详述

本发明提供用于治疗B细胞淋巴瘤，例如，如弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、慢性淋巴细胞性白血病（CLL）、套细胞淋巴瘤和滤泡型淋巴瘤的方法。在一些实施方案中，本发明包括选择患有B细胞淋巴瘤的患者用于本文所述的治疗方法。

本发明提供了治疗B细胞淋巴瘤的方法，其包括施用包含下列的组合物：靶向针对eIF-5A1的3'端的eIF-5A1 siRNA的复合物，包含编码突变eIF5A1的多核苷酸的表达载体，其中所述突变eIF5A1不能被羟丁赖氨酸化，其中所述siRNA和表达载体被络合到聚乙烯亚胺以形成复合物。

本发明提供了包含靶向针对靶基因的siRNA，和编码能够在对象中表达的靶蛋白的多核苷酸的组合物用于治疗B细胞淋巴瘤的用途，所述siRNA抑制对象中靶基因的内源表达，在某些实施方案中，所述多核苷酸在RNAi抗性质粒中（不会被siRNA抑制）。

在某些实施方案中，所述siRNA靶向SEQ ID NO: 1中所示的eIF-5A1序列，并且编码突变eIF-5A1的多核苷酸是eIF-5A1_K50R。表达载体包含编码突变eIF5-A1的多核苷酸和可操作地连接的启动子以提供对象中的多核苷酸的表达。所述启动子优选是组织特异性的或普遍存在的。例如，如果所述组合物用于治疗B细胞淋巴瘤，则所述启动子对于癌症驻留其中的组织是组织特异性的。因此，该启动子可以对于其中B细胞正常被发现的组织，如骨髓和淋巴组织（如淋巴结和脾脏）是特异性的，或者可以对于其中B细胞正常不驻留但其中已形成B细胞肿瘤的组织，例如肺或位于隔膜中其它组织部位是特异性的。例如，对于治疗B细胞淋巴瘤，优选使用B细胞特异性启动子，例如B29。在某些实施方案中，所述表达载体包含pCpG质粒。

本发明还提供了治疗B细胞淋巴瘤的方法，所述方法使用编码截短形式的eIF-5A1的分离的多核苷酸以及截短的eIF-5A1多肽。所述截短的eIF-5A1多核苷酸在诱导细胞凋亡和杀死癌细胞中是有用的。截短的多核苷酸可以在表达载体内使用，其然后施用给哺乳动物。所述截短的eIF-5A形式在哺乳动物内表达并杀死癌细胞。相对于全长eIF-5A1蛋白，其为约17kDa，所述截短的eIF-5A1蛋白为约16kDa。

在某些实施方案中，所述截短的eIF-5A1多核苷酸包含SEQ ID NO: 9所述的序列或由其组成，并且氨基酸序列包含SEQ ID NO: 10或由其组成。在某些实施方案中，所述截短的eIF-5A1多核苷酸包含在质粒或表达载体内。质粒和表达载体在下文更详细地描述。在某些实施方案中，所述表达载体是腺病毒表达载体或是pHM6。在某些实施方案中，当所述组合物或药物用于治疗多发性骨髓瘤时，所述表达载体包含组织特异性启动子，例如B细胞特异性启动子（即，B29）。所述表达载体可以包含pCpG质粒。如下文更详细地讨论，所述表达载体可以络合到聚乙烯亚胺。