[发明专利]用于使损伤的组织和器官再生的生物复合材料、用于制造所述生物复合材料的试剂盒、制造所述生物复合材料的方法和治疗损伤的方法

说明书

技术领域

本发明的目的涉及在医学和兽医学中用于恢复哺乳动物中损伤的组织和器官的生物复合材料，涉及用于制造生物复合材料的试剂盒、制造生物复合材料的方法、治疗损伤的方法以及递送核酸的方法。

背景技术

已知的组织和器官恢复方法是基于含有不同的细胞群体或不同的基因构建体(construction)(核酸)的工程化组织构建体。尽管细胞和基因两种趋势均有前途，但它们具有中等且有限的功效。

一种使用超声仅来施用基因构建体的方法描述于例如(Greenleaf W.J.,Bolander M.E.,Sarkar G.等人，Artificial cavitation nuclei significantly enhance acoustically induced cell transfection.Ultrasound in Medicine and Biology1998；24(4):587-595；Schratzberger P.,Krainin J.G.,Schratzberger G.等人，Transcutaneous ultrasound augments naked DNA transfection of skeletalmuscle.Molecular Therapy2002,6(5):576-583)中。然而，当使用对于受体安全的超声辐射参数时，基因构建体的施用效率较低。递送必需量的基因构建体仅可以在组织经受超声暴露损害的情况下实现(参见例如Duvshani-Eshet M.,Machluf M.Therapeutic ultrasound optimization for gene delivery:a key factor achieving nuclear DNA localization.Journal of Controlled Release2005；108(2-3):513-528；Kim H.J.,Greenleaf J.F.,Kinnick R.R.Ultrasound-mediated transfection of mammalian cells.Human Gene Therapy1996；7(11):1339-1346)。

另一种施用与脂质体成复合物形式的核酸的方法描述于例如(Fraley R.,Subramani S.,Berg P.等人，Introduction of liposome-encapsulated SV40DNA into cells.J Biol Chem.1980；255(21):10431-5)中，并且改进的方法，也就是，使用物理因素(例如超声)施用脂质体结合物与基因构建体的组合描述于例如(Roos A.K.,Eriksson F.,Timmons J.A..Skin electroporation:effects on transgene expression,DNA persistence and local tissue environment.PLoS One.2009；4(9):e7226)中。然而，当暴露于组织中的脂肪分解酶时，显著比例的脂质体遭受破坏，从而降低诸如核酸的活性物质的递送效率。核酸的剩余部分几乎被同时递送，从而不容许实现延长效应。此外，当转运到目标细胞中时，复合物“脂质体-基因构建体”不遭受破坏，而是脂质体进入细胞中，从而降低方法的安全性。

一种经由电穿孔施用核酸的方法描述于例如(Roos A.K.,Eriksson F.,Timmons J.A..Skin electroporation:effects on transgene expression,DNA persistence and local tissue environment.PLoS One.2009；4(9):e7226；Schertzer J.D.,Lynch G.S.Plasmid-based gene transfer in mouse skeletal muscle by electroporation.Methods Mol Biol.2008；433:115-25)中。然而，这种方法是基于施加电场以推动基因构建体(单独地，或与诸如佐剂的其它组分一起存在于复合物中)穿过生物膜。作为这种方法的结果，显著部分的基因构建体受损害。这种方法不容许实现延长效应，因此需要重复使用这种方法。