[发明专利]用于防止心脏缺血-再灌注损伤的多肽

说明书

本发明涉及一种用于防治心脏缺血-再灌注损伤(heart ischemia-reperfusion injury)的多肽。

在对冠状动脉分支(一种供给心肌的动脉)闭合进行治疗之后，发生心肌损伤。此损伤称作再灌注损伤。该现象可以在一个实验环境中进行模拟，在此情况下模拟对大鼠离体心脏进行。

缺血-再灌注损伤(IRI)是一种在足够长的中断之后的血流恢复时影响心肌的综合症，例如冠状动脉血栓形成或心脏手术[1,2]中所遇到的情况。该综合症的主要组成包括：心肌细胞死亡、心肌顿抑、心律失常和无复流[1]。在最近30年中，为阐明IRI的病理生理学性质，积累了大量的实验研究素材，其中主要关注心肌细胞死亡及限制其的方案。一类这样的方案是药物后调理(pharmacological postconditioning)，其中在血流恢复的同时施以心脏保护剂。这种时间选择使得后调理与临床前瞻性相关，其中在冠状动脉血栓形成和ST段抬高型心肌梗死之后的不可逆心肌损伤的限制仍是主要目标[3]。

Bose,A.K.等[4]在Cardiovasc Drugs Ther(2007)21:253-256中公开了单用GLP-1未能降低心肌梗塞，而当与GLP-1分解抑制剂缬氨酸吡咯烷(VP)联用时心肌梗塞的发生显著降低。

EP–A-1012188公布了用于治疗糖尿病和肥胖症的N-Ac-GLP-1-(7-34)-酰胺及其衍生物。

本发明的一个目的是提供一种心脏缺血-再灌注损伤疗法，该方法通过给予可作为单组分进行施用的GLP-1类似物并避免给予该药物与第二化合物。

本发明基于这样的意外发现：本发明的肽具有心血管保护作用而无需同时给予其它化合物，具体地，它们具有保护心脏抵御缺血-再灌注损伤的作用。使用N末端封闭、C末端截断的N-Ac-GLP-1(7-34)酰胺进行后调理限制了大鼠离体心脏中的缺血-再灌注损伤。心舒期高挛缩减弱和梗塞面积减小体现了N-Ac-GLP-1(7-34)酰胺的该有益效果。

图1：该图概括了含氧量正常(A)和缺血-再灌注(B)实验的时间进程。

图2：缺血-再灌注对左室舒张压(LVD)、左室发展压(LVDEV)和心率血压乘积(RPP)的作用如图2A-C所示。在A图中，*表明与“无肽”条件相比，P<0.05。

图3：N-Ac-GLP-1(7-34)酰胺对梗塞面积的作用。各柱代表平均梗死面积(IS)(N＝7-14)，计算为心肌缺血面积(Area at Risk，AAR)(％IS/AAR)的百分率，而各短棒指示SEM。各治疗组的命名如图2所示。*是指与“无肽”条件相比，P<0.05。

根据本发明，式

R¹-NH-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVK-CONR²R³所示肽可用于治疗和预防心脏缺血-再灌注损伤，

其中，R为H或含1-10个碳原子的有机化合物，且R²、R³独立地为H或具1-4个碳原子的烷基；

可用于治疗和预防心脏缺血-再灌注损伤。

在该肽的序列中，氨基酸用单字符表示，但明确标明N末端(R¹-NH-)和C末端(-CONR²R³)。

在本发明所用的肽中，R¹代表酰基。

特别地，R¹为甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基，和/或，特别地，R²、R³独立地为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基，特别是，R²＝R³，为氢、甲基或乙基。例如，肽的C末端可以是酰胺、二甲基酰胺、二乙基酰胺，但也可以是混合酰胺，如单甲基酰胺、单乙基酰胺、甲基乙基酰胺等等。本领域技术人员不难理解这些组合。

该肽可经修饰，其中R-GLP-1-(7-34)-酰胺8位的A被选自下组的中性氨基酸取代：S、G、C、Sar、β-丙氨酸和Aib；和/或

R-GLP-1-(7-34)-酰胺10位的G被中性氨基酸取代；和/或

R-GLP-1-(7-34)-酰胺15位的D被酸性氨基酸取代。

特别地，在该肽中，A可以被S、G、C、Sar、β-丙氨酸和Aib取代。