[发明专利]来自患者的诱导性多能干细胞的心肌细胞及其使用方法

权利要求书

1.一种候选试剂的心脏病相关筛选的方法，所述方法包括：将所述候选试剂与一种或一组分化自诱导性人多能干细胞(iPS细胞)的心肌细胞接触，所述iPS细胞包含编码心脏病相关突变的至少一种等位基因；和测定所述试剂对于形态学参数、遗传参数或功能性参数的影响。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述心脏病选自扩张型心肌病(DCM)、肥大型心肌病(HCM)、蒽环类抗生素诱导的心脏中毒、心律失常性右心室发育不良(ARVD)、左心室致密化不全(LVNC)、左心室双入口(DILV)和长QT(1型)综合征(LQT-1)。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述突变选自：心脏肌钙蛋白T(TNNT2)；肌球蛋白重链(MYH7)；原肌球蛋白1(TPM1)；肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)；5′-AMP-活化的蛋白激酶亚基γ-2(PRKAG2)；3型肌钙蛋白I(TNNI3)；肌联蛋白(TTN)；肌球蛋白，轻链2(MYL2)；肌动蛋白，α心肌1(ACTC1)；电压门控性钾通道，KQT-样亚家族，成员1(KCNQ1)；斑菲素蛋白2(PKP2)和心脏LIM蛋白(CSRP3)。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述心脏病是扩张型心肌病(DCM)。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述突变是TNNT2R173W。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，相对于正常心肌细胞，所述DCM心肌细胞具有响应正性肌力压力的初始正性变时作用，之后变为以衰竭为特征的负性作用。

7.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述心脏病是肥大型心肌病(HCM)。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述突变是MYH7R663H。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，相对于正常心肌细胞，所述HCM心肌细胞展现出细胞大小增大、异常Ca²⁺瞬变的较高发生率以及细胞内Ca²⁺水平升高。

10.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述心脏病是心律失常性右心室发育不良(ARVD)。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述突变是PKP22013delC突变或PKP2Q617X突变之一。

12.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述心脏病是长QT(1型)综合征(LQT-1)。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述突变是KCNQ1G269S错义突变。

14.如权利要求2所述的方法，其特征在于，一组心肌细胞包含具有不同基因型的至少两种心肌细胞。

15.如权利要求2所述的方法，其特征在于，一组心肌细胞包含在不同环境条件下的心肌细胞。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，一种或多种所述环境条件包含采用β-肾上腺素激动剂的刺激。

17.如权利要求2所述的方法，其特征在于，对所述试剂的影响的测定包括单细胞分析。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，所述单细胞分析包括原子力显微镜、微电极阵列记录、膜片钳、单细胞PCR和钙成像中的一种或多种。

19.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述候选试剂是候选药物。

20.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述候选试剂是遗传物质。

21.一种分化自诱导性人多能干细胞(iPS细胞)的心肌细胞的经分离的群或组，所述iPS细胞包含编码心脏病相关突变的至少一种等位基因。

22.如权利要求20所述的分化自诱导性人多能干细胞(iPS细胞)的心肌细胞的经分离的群或组，其特征在于，所述心脏病选自：扩张型心肌病(DCM)、肥大型心肌病(HCM)、蒽环类抗生素诱导的心脏中毒、心律失常性右心室发育不良(ARVD)、左心室致密化不全(LVNC)、左心室双入口(DILV)和长QT(1型)综合征(LQT-1)。