[发明专利]用于移植和移植物排斥的体外预后和诊断的生物标志物

说明书

本发明涉及新型肽、它们的衍生物以及包含其的组合物，它们作为移植器官疼痛(distress)、特别是移植或移植物排斥的预后或诊断中的工具的用途。

肾在活生物体中的主要功能是清除血液的废弃物或毒性物质。肾损伤可损害肾结构(肾小球或小管细胞缺失、纤维化和肾脉管系统改变)，这导致慢性肾排泄功能障碍(Lopez-Novoa等人,J Transl Med2011,9:13)。慢性肾病的演化可通过关键病理事件例如肾单位功能活性的百分比、肾小球滤过率、肾排泄功能或通过血浆和尿生物标志物(肌酸酐、尿酸……)的测量来监测。按照肾功能障碍和肾损伤将慢性肾病的进展分成了5个阶段(Levey等人,Ann Intern Med2003,139,137-147)。阶段1通常是其中肾功能障碍可被逆转的沉默期，而晚期的阶段4和阶段5对应于肾衰竭，并且需要肾替代疗法例如透析或任何可行时的肾移植。

器官移植也可在其它器官系统例如循环系统(心脏)、消化系统(肝)和呼吸系统(肺)中发生。患有白血病的患者还可接受软组织移植，即骨髓移植。

在欧洲每年进行超过15000例肾移植、5000例肝移植、2000例心脏移植和1000例肺移植。器官移植通常是用于最终状态器官衰竭的唯一治疗。细胞和组织例如造血干细胞或心脏瓣膜也用于移植来恢复基本功能。不利事件和反应例如移植或移植物排斥通常在接受者中发生。这可至少导致移植物的损害和最终导致其丧失。免疫抑制药物的使用通过调节接受者的免疫应答来帮助改善移植的结果。然而，这些药物诱导一组对于患者不利的事件，所述事件限制他们的生活质量或存活预期。最常见的副作用是肾毒性、癌症和心血管事件。

已鉴定了移植或移植物排斥所基于的分子机制。免疫排斥是通过抗提供者细胞的接受者T细胞的活化介导的。接受者T细胞识别提供者的主要组织相容性复合物(MHC)I类编码的抗原。T细胞和其它单核白细胞(例如B细胞和天然杀伤细胞)对移植器官的浸润通过活化补体系统和单核细胞而促成损害移植物。CD4+和CD8+T细胞均参与急性细胞排斥。抗提供者MHC I类和II类抗体的产生也与急性和慢性移植物损害相关。在慢性移植排斥中，接受者免疫应答的活化可能不是排斥的唯一原因。其它原因例如纤维化、病毒感染或原始疾病的复发可能在移植排斥中起重要作用(Sanchez-Fueyo等人,Gastroenterology2011,140,51-64)。

排斥发作通过常规临床参数来诊断，所述参数对于移植器官是特异性的并且取决于遗传因子，主要通过活组织检查来确认。目前，利用常规组织学检查的组织同种异体移植物活组织检查仍然是用于诊断经移植的患者中排斥的金标准(Racusen等人,The Banff 97 working classification of renal allograft pathology,Kidney International 1999,55,713-723)。由于程序活组织检查是侵入性方法，因此需要医生的干预来收集移植器官的小块组织。尽管这些测试相当准确地预测移植失败，但它们通常在相对晚的时期检测其，此时广泛的组织损害已发生。组织损害发生前对移植失败的早期检测可能帮助医生更高效地监测免疫抑制药物，使它们的副作用最小化、同时延长移植存活率。表明哪些患者处于随后急性同种异体移植排斥和慢性同种异体移植功能障碍的最高风险中的血清中蛋白质的鉴定在开发可用于体液样品的新型体外预后和诊断测定中可能是有帮助的。

鉴定用于移植和移植物排斥的生物标志物仍然具有挑战性。在过去十年中，已开发了不同的策略来鉴定此类标志物。第一种策略在于就特定蛋白质在免疫反应系统中的已知影响而言选择所述蛋白质。US 2008/274910公开了TIRC-7(T细胞免疫应答cDNA7)在肾移植患者血液中的增强的表达特征谱对于可导致移植排斥的免疫活化的早期活化是决定性的。

更普遍的蛋白质(不参与免疫系统)例如TRIB-1（一种MAP激酶激活剂）(WO 2007/138011)或溶菌酶(JP 2006/6177679)已被鉴定为分别用于肾或肠急性移植排斥的体外诊断和或预后的标志物。在所有先前的实例中，使用了单种蛋白质。

另一个策略是研究移植器官的转录特征谱。在WO 2004/074815中，发明人研究了在血管再灌注后15分钟内已知基因在移植肾组织上的表达，所述基因编码介导免疫活化的促炎性或粘着蛋白和抗凋亡蛋白。结果显示可从与临床信息相结合的基因簇的差异表达预测延迟的移植物功能、急性排斥或延迟的排斥。