[发明专利]核酸的分离在审
| 申请号: | 201280034773.0 | 申请日: | 2012-05-11 |
| 公开(公告)号: | CN103649298A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
| 发明(设计)人: | J.J.布鲁因斯马;M.J.多玛尼科;G.P.里德加德;邹鸿志;W.G.维斯伯格;H.D.舍诺伊;J.P.莱特二世 | 申请(专利权)人: | 精密科学公司 |
| 主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12Q1/68;C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 罗天乐 |
| 地址: | 美国威*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 核酸 分离 | ||
1.一种旋转过滤器,其包括:
a)中空主体;
b)底部末端;和
c)与所述底部末端相对的开放的顶部末端,
其中所述中空主体由多孔的过滤材料制得。
2.如权利要求1所述的旋转过滤器,其中所述底部末端由多孔的过滤材料制得。
3.如权利要求1所述的旋转过滤器,其中所述多孔的过滤材料是聚乙烯。
4.如权利要求1所述的旋转过滤器,其中所述多孔的过滤材料具有20微米的标称孔径。
5.如权利要求1所述的旋转过滤器,其中所述底部末端具有选自由半球形、盘形、锥形或椭圆体的一部分组成的组的形状。
6.一种旋转过滤器组件,其包含如权利要求1所述的旋转过滤器和适合容纳所述旋转过滤器的收集容器。
7.一种从样品产生滤液的方法,所述方法包括:
a)将有待过滤的样品放置在根据权利要求1所述的旋转过滤器中;并且
b)离心所述旋转过滤器,
其中在所述过滤期间,所述样品的一部分经过所述旋转过滤器的多孔的过滤材料以产生滤液。
8.一种从包含核酸的粗制样品制品除去测定抑制剂的方法,所述方法包括:
a)在分离所述核酸之前将不溶的聚乙烯吡咯烷酮在所述测定抑制剂与所述聚乙烯吡咯烷酮结合产生复合物的条件下加至所述粗制的样品制品;
b)将所述复合物从所述粗制样品制品分离以产生含有所述核酸的澄清的样品制品。
9.如权利要求8所述的方法,其中所述粗制样品制品是从粪便样品制备的上清液。
10.如权利要求9所述的方法,其中所述粪便样品具有至少4克的质量。
11.如权利要求9所述的方法,其中所述粪便样品具有至少8克的质量。
12.如权利要求8所述的方法,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是聚乙烯聚吡咯烷酮。
13.如权利要求8所述的方法,其中所述分离包括离心。
14.如权利要求8所述的方法,其中所述澄清的样品制品是根据权利要求7生产的。
15.如权利要求8所述的方法,其中所述聚乙烯吡咯烷酮包含具有约100微米至约130微米的平均直径的颗粒。
16.一种用于从包含核酸的粗制样品制品除去测定抑制剂的系统,所述系统包括:
a)用于结合所述测定抑制剂并且产生复合物的不溶的聚乙烯吡咯烷酮;
b)将所述复合物从所述粗制样品制品分离以产生包含所述核酸的澄清的样品制品的功能性;和
c)保留包含所述核酸的澄清的样品制品的功能性。
17.如权利要求16所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是聚乙烯聚吡咯烷酮。
18.如权利要求16所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮是预量形式的。
19.如权利要求16所述的系统,其中所述聚乙烯吡咯烷酮作为片剂提供。
20.如权利要求16所述的系统,其中所述分离所述复合物的功能性包括根据权利要求1-5中任一项所述的旋转过滤器。
21.如权利要求16所述的系统,其中所述保留包含所述核酸的澄清的样品制品的功能性是根据权利要求6所述的收集容器。
22.一种从粪便样品分离许多不同靶核酸的方法,所述方法包括:
a)将包含多个不同靶核酸的粪便样品制品与第一靶特异性捕获试剂在第一靶核酸与所述第一靶特异性捕获试剂结合形成第一复合物的条件下接触;
b)将所述第一复合物从所述粪便样品分离以产生第一残留粪便样品制品;
c)将所述第一残留粪便样品制品与第二靶特异性捕获试剂在第二靶核酸与所述第二靶特异性捕获试剂结合形成第二复合物的条件下接触;
d)将所述第二复合物从所述第一残留粪便样品分离以产生第二残留粪便样品制品;
e)将所述第一靶核酸从所述第一复合物洗脱以产生第一靶核酸溶液;和
f)将所述第二靶核酸从所述第二复合物洗脱以产生第二靶核酸溶液。
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