[发明专利]用于神经退行性病症的生物化学标志物

说明书

用于对与神经退行性病症相关的肽片段进行定量的生物测定方法，所述肽片段包含由分泌酶(例如ADAM10)切割Tau蛋白所形成的新表位，所述方法包括将来源于血液的样品与对所述新表位有特异性的抗体相接触，以及测定所述免疫结合伴侣与所述样品中的肽片段的结合水平。发现含新表位的肽的水平与认知功能负相关。

本发明涉及神经退行性病症或神经退行的生物标志物的开发，更具体地涉及用于检测生物化学标志物的测定，所述生物化学标志物在阿尔茨海默氏病的诊断应用中和疾病发展的预后中有价值，其包括指示对治疗方案的应答的生物化学标志物。

阿尔茨海默氏病(AD，通常被称为阿尔茨海默(Alzheimer’s))是进行性且最终致命的神经性病症，其主要影响65岁以上的人群。据估算在世界范围内AD已影响3.56亿的人口(2009)，且预测这个数字会每20年翻倍。仅在美国，每年AD的花费就合计超过1480亿美元，且在世界范围内这个数字超过3200亿美元[3]，经比较，与痴呆症(其中AD占病例的50-75％)看护相关的花费显然超出了与癌症和心脏病看护相关的花费，这突显出对于个人以及卫生保健二者AD都是严峻的社会负担。虽然阿尔茨海默氏病的病程存在个体差异，但有一些共同症状，这些症状中最早的通常是认知性的，其往往被错误地认为是由年龄增长或压力造成的[37]。早期症状包括短期记忆衰退，如果怀疑患病，进行行为评估和认知测试以及如果可行的话进行脑部MR扫描以进一步确认诊断[37]。随着疾病进展，包括一系列神经性问题的症状(例如思维混乱、易怒和有攻击性、语言障碍、长期记忆缺失)导致个体变得性格内向[2]。最终，身体功能开始衰退，最终导致死亡，并且确诊后的平均预期寿命约为七年[2；28]。

与更好地治疗和了解AD相关的主要问题是，该疾病的早期发生隐蔽，因此AD通常经过若干年发展后才充分表现出来并导致确诊[13]。此外，在大多数病例中，通常只有在其它造成AD症状的可能原因都被排除的情况下具有AD症状的个体才被诊断为该疾病的“可能”患者。虽然诊断标准已通过使用智力功能测试而标准化，但普遍接受的仍然是AD仅可通过尸检来最终确诊[27]。

近期的研究表明使用生物化学标志物以及成像技术取得了一些进展，但这些方法仍需进一步鉴定和确认，且通常因在发病早期阶段缺乏敏感度而受局限[24；33；34；38；39]。

目前使用的治疗提供了小的姑息性作用；并且能够减缓或抑制进展的治疗是被热切追寻的目标，这通过以下事实说明：已进行超过500个临床试验来鉴定AD的可行疗法，但目前仍没有能明确鉴定到可行疗法[1]。这些数据以及已建立的AD生物标志物的缺乏性都清楚地说明投入开发这样的生物标志物的必要性，即可以更准确地反映AD的重要方面(例如疾病的发作、进展及对治疗的应答)的生物标志物。

除涉及APOEε4变体的病例外，评估阿尔茨海默氏病的风险几乎是不可能的[8]。此外，虽然可以监测试验药物的疗效，但这种监测通常直接与药物的作用方式而非AD的整体病理学相关[8]。

来自AD个体的脑组织的分析突出了细胞外基质重塑的紊乱[12]，主要显示了两个重要的现象，即含有β淀粉样蛋白(Aβ)的斑块的形成，和含有Tau蛋白的经修饰形式的神经元纤维缠结的形成[10]。这两种过程都与疾病的进展高度相关，并且有趣的是，Aβ在斑块的沉积要先于实际的神经元损伤[30]，但参与触发神经元纤维缠结的形成[32]，后者似乎是神经元细胞死亡的主要原因[5；18]。APP是在许多组织中表达并且集中在神经元突触的整合膜蛋白。APP的主要功能未知，最经常将其作为β淀粉样蛋白(Aβ，39至42个氨基酸的肽)的前体分子来研究，当以淀粉样蛋白纤维形式存在时，其是淀粉样蛋白斑块的主要组分[10]。Aβ由两种蛋白水解切割产生，第一种切割通过β-分泌酶(BACE-1)进行并且第二种切割通过γ-分泌酶进行。这些连续的生物化学事件对Aβ的形成至关重要[10]。此外，APP的其它酶促切割(例如通过ADAM10(解整合素和金属蛋白酶10，A Disintegrin AndMetalloproteinase10)和早老素-1的酶促切割)以及其它类型的翻译后修饰产生了临床意义仍未完全阐明(尽管预计他们与疾病进展相关)的经修饰肽片段[10；11；19；25；40]。