[发明专利]用于改善的蛋白质分泌的表达载体在审
申请号: | 201280026365.0 | 申请日: | 2012-05-25 |
公开(公告)号: | CN103649310A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | C·德格林;T·埃格特;S·埃弗斯;K-H·莫勒;J·邦盖尔茨 | 申请(专利权)人: | 巴斯夫欧洲公司 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 德国路*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 改善 蛋白质 分泌 表达 载体 | ||
1.表达载体,包含
a)启动子序列,和
b)编码蛋白质的核酸序列,所述蛋白质包含信号肽和另外的氨基酸序列,并且信号肽包含与SEQ ID NO.2中说明的氨基酸序列至少80%相同,或与SEQ ID NO.4中说明的氨基酸序列至少80%相同,或与SEQ ID NO.6中说明的氨基酸序列至少80%相同的氨基酸序列,或者信号肽包含与这些序列中的至少一个在结构上同源的氨基酸序列。
2.根据权利要求1的表达载体,其中由核酸序列b)编码的信号肽具有根据SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2的表达载体,其中蛋白质的另外的氨基酸序列包含酶的氨基酸序列,更特别地包含蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、半纤维素酶、甘露聚糖酶、鞣酸酶、木聚糖酶、黄原胶酶、木糖葡聚糖酶、β-葡糖苷酶、果胶切割酶、卡拉胶酶、perhydrolase、氧化酶、氧化还原酶或脂肪酶的氨基酸序列。
4.根据权利要求1至3中任一项的表达载体,其中信号肽排列在由核酸序列b)编码的蛋白质中的另外的氨基酸序列的N端。
5.根据权利要求1至4中任一项的表达载体,其中由核酸序列b)编码的蛋白质还包含排列在蛋白质的信号肽和另外的氨基酸序列之间的连接序列,连接序列的长度特别地在1和50个氨基酸之间。
6.根据权利要求1至5中任一项的表达载体,其中蛋白质的另外的氨基酸序列包含蛋白酶的氨基酸序列,所述蛋白酶的氨基酸序列
与SEQ ID NO.7至少80%相同,或
与SEQ ID NO.8至少80%相同,或
与SEQ ID NO.9至少80%相同,或
与SEQ ID NO.10至少80%相同,并在根据SEQ ID NO.10的编号的第99位具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D),或与SEQ ID NO.10至少80%相同,并在根据SEQ ID NO.10的编号的第99位具有氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D),并还在根据SEQ ID NO.10的编号中具有下列氨基酸中的至少一个:
(a)第3位的苏氨酸(3T),
(b)第4位的异亮氨酸(4I),
(c)第61位的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(61A、61T或61R),
(d)第154位的天冬氨酸或谷氨酸(154D或154E),
(e)第188位的脯氨酸(188P),
(f)第193位的甲硫氨酸(193M),
(g)第199位的异亮氨酸(199I),
(h)第211位的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(211D、211E或211G),
(i)氨基酸(a)至(h)的组合。
7.非人宿主细胞,其包含根据权利要求1至6中任一项的表达载体。
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