[发明专利]改进柱分离工序洗涤液和洗脱液配比去除杂质的方法

权利要求书

1.一种研究柱分离工序洗涤液和洗脱液配比去除杂质的方法，其特征在于：采用精品上柱工序用最佳配比度的洗涤液、洗脱液的浓度最大限度地去除可见杂质，解决原来的洗涤液和洗脱液配比做出的产品杂质多并且在以后的步骤中难以去除的问题。

2.根据权利要求1所述的用最佳配比度的洗涤液、洗脱液的浓度去除可见杂质的方法，其特征在于所述的柱分离工序中最佳配比度洗涤液的工艺为：

1、缓冲液配制

A、缓冲液1：0.01mol/L醋酸铵，用纯化水溶解，加冰醋酸调pH5.0；

B、缓冲液2：0.01mol/L磷酸二氢钾-磷酸氢二钾，按1∶8比例用纯化水溶解，调PH5.8。

C、洗脱液：0.2mol/L乙酸铵PH8.5。

2、上样

温度在20℃以下，将DEAE干燥品按1∶60比例溶解于pH5.0缓冲液中，成上柱液；用醋酸或氨水调节上柱液的pH，至pH5.0；上CG-50柱，流速控制在20-30ml/分。

3.洗涤

上样结束后，用pH5.0缓冲液洗涤2倍柱床体积，流速控制在20ml/分：再用pH5.8的洗涤液洗涤4倍床体积，流速控制在30ml/分。

4.洗脱

用洗脱液洗脱，流速控制在30ml/分左右，至流出液OD值在0.3以上，滴加乙醇变浑浊后开始收集流出液，直到OD值在0.3以下，停止收集流出液。

5.沉淀

量出收集液体积，转入不锈钢桶内，加入冷乙醇，用玻璃棒搅拌沉淀，然后置冷库沉淀过夜。

6.干燥

次日，虹吸弃去桶内的上清液，下层沉淀置入离心罐内，离心30分钟，弃去上清液；用少量的无水乙醇洗涤，研磨，离心弃去上清液，重复二次；置于五氧化二磷干燥箱内干燥，干燥得干燥品。