[发明专利]一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及黄酮的提取技术，具体涉及一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法。

背景技术

南方红豆杉叶中含有紫杉醇、紫杉黄酮和红豆杉多糖等药效成份，紫杉黄酮含有共同的母核C₆-C₃-C₆结构，具有调节心脏血管系统作用、抗炎及抗免疫作用、抗微生物作用、对消化性溃疡的作用和抗肿瘤作用等。授权号为ZL200910157034.0的中国发明专利公开了一种南方红豆杉叶片的提取物及提取方法，提取物主要成份包括芦丁-3-O-槲皮素、芦丁-3-O-山奈酚、芦丁-3-O-杨梅酮、山奈酚-7-O-葡萄糖和葡萄糖-7-O-槲皮素；提取方法包括叶片烘干、粉碎过筛、浸入乙醇溶剂、搅拌下超声提取、提取液减压浓缩去醇、氯仿萃取脱脂、水相浓缩干燥步骤，该方法获得的是各种黄酮的混合物。授权号为ZL201010604150.5的中国发明专利公开了一种从南方红豆杉叶片提取金松双黄酮（C₃₀H₁₅O₇）的方法，提取方法包括叶片烘干、粉碎过筛、超声波萃取、AB-8大孔树脂层析、硅胶柱层析分离等过程。南方红豆杉中未发现提取出红豆杉素（属紫杉黄酮类）的公开报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法，该方法从南方红豆杉叶首次提取得到纯度较高的红豆杉素单体，为该红豆杉素的药理研究和应用创造了条件。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法，其步骤如下：

1、将新鲜的南方红豆杉叶片在50℃温度下烘干24h，粉碎，过8号筛为粉料，装入超临界萃取釜中；

2、超临界萃取釜中，在萃取温度为25℃，CO₂流体压力为22MPa，夹带剂乙醇流速0.17 ml/min下，萃取1 h，萃取得到萃取物；

3、在萃取物中添加甲醇吸收为吸收液，所述甲醇的添加量为上述粉料5g的萃取物中添加甲醇1ml，吸收液用AB-8树脂层析，然后用质量百分浓度为80%的乙醇洗脱，得到第一洗脱液，第一洗脱液在500Pa下减压浓缩60min，得到第一浓缩液，第一浓缩液用100目聚酰胺层析，再用质量百分浓度为20 %的乙醇洗脱，收集12～15 min的洗脱液，浓缩干燥，得到白色结晶化合物，该白色结晶化合物为红豆杉素，该红豆杉素分子式为C₂₇H₃₀O₁₅。采用高效液相色谱法测定，白色结晶化合物中红豆杉素纯度达到99.28%。

本发明红豆杉素的分子式为C₂₇H₃₀O₁₅，是本发明人首次从南方红豆杉中提取和分离出来，本发明人命名为红豆杉素，该红豆杉素的化学结构名称为4H-1-Benzopyran-4-one, 3-[[4-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]oxy]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl。是一种新的紫杉黄酮类化合物，该红豆杉素的结构式为：

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与现有技术相比，本发明的优点在于一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法，通过超临界萃取釜萃取，甲醇吸收，AB-8树脂层析后，再用100目聚酰胺层析，收集12～15 min的洗脱液，浓缩干燥得到分子式为C₂₇H₃₀O₁₅的红豆杉素，该提取方法简单，提取的红豆杉素白色结晶纯度较高，达到99.28%，为该红豆杉素的药理研究和应用创造了条件。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。

实施例：一种从南方红豆杉叶中提取红豆杉素的方法，先将新鲜的南方红豆杉叶片在50℃温度条件下烘干24h，粉碎，过8号筛为粉料，称重50g，装入超临界萃取釜中；超临界萃取釜中在萃取温度为25℃，CO₂流体压力为22MPa，夹带剂乙醇流速0.17 ml/min下，萃取1 h，得到萃取物；萃取物中添加10ml甲醇吸收为吸收液，吸收液用AB-8树脂（市售）层析，AB-8树脂为弱极性，表面积480～520( m2/g )，粒子半径13～14nm，含水量64%；层析后用质量百分浓度为80%的乙醇洗脱，得到第一洗脱液，第一洗脱液在500Pa下，减压浓缩60min，得到第一浓缩液，第一浓缩液用100目聚酰胺（市售）层析，再用质量百分浓度为20%的乙醇洗脱，收集12～15 min的洗脱液，浓缩干燥，得到白色结晶化合物，该白色结晶化合物为红豆杉素，采用高效液相色谱法常规测定，其纯度达到99.28%。经分子结构分析，其分子式为C₂₇H₃₀O₁₅，是一种新的紫杉黄酮类化合物。