[发明专利]一种分子印迹电致发光检测抗生素残留的电压可控和多路转换的多通道传感纸芯片的制备

说明书

技术领域

本发明涉及抗生素残留检测技术领域，更具体地说是一种分子印迹电致发光检测抗生素残留的电压可控和多路转换的多通道传感纸芯片的制备，本发明还涉及采用所述的电致发光传感器检测乳、肉、蛋制品中的抗生素残留物的方法。 

背景技术

抗生素是微生物在代谢过程中对其他微生物具有杀灭或抑制作用的次级代谢产物，从上世纪50年代起，在畜禽养殖业中开始被普遍使用，其主要用途包括动物疾病治疗、动物生长调节剂以及提高饲料利用效率等。抗生素作为药物和非药物对畜禽养殖业的发展起到重要作用，在很多国家的使用量也在不断增加。使用抗生素后对畜牧业的发展做出了相当大的贡献，但是随之而来也给乳、肉、蛋制品加工行业和消费都带来了危险，食用含有抗生素的乳、肉、蛋制品对人有致敏、产生耐药性的风险，对人体健康不利。 

随着人们对乳、肉、蛋制品由需求型向质量型的转变，乳、肉、蛋制品中的抗生素残留也逐渐成为全世界关注的一个焦点。除了严格控制抗生素使用的监督管理，还必须不断研究新的检测方法。 

建立一种高灵敏度和特异性的快速检测抗生素残留物的方法，便成为当前该研究领域亟需解决的问题之一。目前已有的抗生素残留物检测方法主要包括高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法、荧光法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫分析法和微生物法等，但是这些检测或筛检方法存在不足。 

1. 高效液相色谱法检测抗生素残留物是目前国内绝大多数检测机构都在使用的方法，虽然灵敏度高，但存在样品的前处理相对复杂、检测周期长、程序复杂、所需试剂繁多等缺点。 

2. 紫外-可见分光光度法和荧光法具有操作简单、成本低、线性范围宽等优点，但是其灵敏度和选择性不高。 

3. 液相色谱-质谱联用法灵敏度比较高，但是仪器昂贵，操作比较复杂。 

4. 酶联免疫分析法灵敏度高，但是操作步骤比较复杂，而是试剂昂贵，成本比较高。

5. 微生物法具有成本低、省时等优点，但一般只应用于筛选实验。 

以上几种方法对于抗生素残留物的检测和分析，一般都存在检测成本高、结果假阳性、检测过程复杂、成本高、试剂用量大、不适于现场快速检测、共存物质干扰大等缺点，因此不能满足实际检测的需要。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供了一种具有样品处理简单、检测速度快、成本低、灵敏度高、特异性强等特点的分子印迹电致发光检测抗生素残留的电压可控和多路转换的多通道传感纸芯片。 

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下措施来实现的：一种分子印迹电致发光检测抗生素残留的电压可控和多路转换的多通道传感纸芯片的制备，其特征是包括以下步骤： 

(1). 制备电压器（如附图1）和多路复用开关（如附图2）；

(2). 制备多通道纸上印刷电极：先用蜡打印机在A4纸上打印如附图3所示的蜡图案，并将带有蜡图案的A4纸放置到平板加热器或烘箱中，在60-150℃摄氏度下加热0.5-2分钟，使蜡融化并浸透整个纸的厚度，形成疏水区；采用丝网印刷方法，在处理好的A4纸的未打印蜡的区域印刷碳工作电极和Ag/AgCl 参比电极（如附图4）；

(3). 选择能与抗生素残留物合成分子印迹聚合物 (Molecularly Imprinted Polymers，简称MIPs) 的功能单体；

(4). 按一定摩尔比将残留抗生素的模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和硅源混合均匀制成MIPs溶胶；

(5). 制备石墨烯；

(6) 制备碳点；

(7). 制备碳点包覆的二氧化硅微球；

(8). 利用层层自组装表面修饰技术等，将石墨烯和碳点包覆的二氧化硅微球及MIPs溶胶修饰到纸上多通道纸电极表面上，制作纸上多通道分子印迹电致发光传感器。

本发明所述抗生素残留物模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和硅源的摩尔比为0.1～1∶1∶0.5～3∶30～45∶0.05～0.2∶5～15。 

本发明所述石墨烯、碳点包覆的二氧化硅微球和分子印迹聚合物 (MIPs) 修饰到纸上多通道电极表面包括以下步骤： 

(1) 将所制备的纸上多通道印刷电极用玛瑙锤子仔细地打磨2 min；

(2) 将石墨烯超声分散处理，制备分散的石墨烯溶液；

(3) 将步骤 (1) 处理过的纸电极表面滴加经过步骤 (2) 处理的10 μL石墨烯溶液，并晾干；