[发明专利]一种利用锈菌防治三裂叶豚草的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物防治领域，特别是一种利用锈菌防治三裂叶豚草的方法，具体涉及三裂叶豚草锈菌菌种保藏、菌种复壮、菌种收集、接种方法。

背景技术

三裂叶豚草是世界上公认的危险性杂草，具有生长迅速、竞争力强、适应能力强、传播途径多、繁殖系数大的特点，一旦侵入农田，很快形成优势群落。豚草花粉是引发过敏性鼻炎和支气管哮喘等疾病的主要病原，患者出现眼、耳、鼻奇痒，头痛、胸闷、咳嗽和哮喘等病症，并可引起并发性肺气肿、肺心痛等疾病。

豚草危害苜蓿、牧草、大豆等旱田作物。目前防治三裂叶豚草主要依赖人工拔除、化学药剂防治、天敌昆虫，未见用专性寄生真菌防治三裂叶豚草。防治方法主要有播前翻耕、中耕及化学除草。果园和非耕地使用2，4-D丁酯（2，4-D）、敌草快（Diquat）、西玛津（Simazine）、阿特拉津（Atrazine）和草甘膦（Glyphosate）等化学药剂处理以及人工多次拔除。靠人力往外拔非常费劲，故经常使用刀割，同时戴上防护手套，因此，工作量很大。除此之外，采用化学药品，但局限性很大，因为有的豚草散布在其他作物中间，大规模用药不仅成本高，而且易对其他作物造成危害，并造成环境污染。

使用锈菌防治三裂叶豚草，无残留，无污染，也不会侵染其他作物，具有环境安全性。

发明内容

本发明的目的是上述问题，提供一种利用苍耳柄锈菌三裂叶豚草专化型（Puccinia xanthii Schwein. f. sp. ambrosiae-trifidae Batra）防治三裂叶豚草的方法，操作简便，成本低，无残留，无污染，也不会侵染其他作物，具有环境安全性。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

     7月份于野外采集带有锈菌冬孢子的三裂叶豚草叶片，阴干备用。

将三裂叶豚草种子利用浓度为98%的浓硫酸浸泡处理50s-60s，可以破坏三裂叶豚草种子种皮，利用质量比0.5%的赤霉素浸泡处理72h；于日光温室中播种，土壤湿度85%以上，温度20℃-25℃，覆土3-5cm；待三裂叶豚长到4～6对叶，备用。

配制冬孢子悬浮液：将带有冬孢子的干燥三裂叶豚草叶片用小型粉碎机粉碎，过60目筛，获取冬孢子粗粉；将冬孢子粗粉加入水溶液，加入质量比的终浓度0.5%-1%的木糖或乳糖，用显微镜检查使冬孢子浓度10⁵-10⁶个/ml，即为备用的冬孢子悬浮液。

将制备好的冬孢子悬浮液装入喷雾器中，摇匀后均匀地喷洒于三裂叶豚草幼苗的叶片上；温室室内温度20～25℃、相对湿度97%。

接种7-15天后，三裂叶豚草叶子发病，取病斑面积超过叶面积50%的叶子，浸入水中，用硬毛刷将冬孢子刷下，配成10⁵个/ml的水溶液，在每500ml的水溶液中加入1-2ml吐温80和1-2ml透明质酸，即为冬孢子悬浮液。

于傍晚用喷雾器将冬孢子悬浮液加水喷洒在三裂叶豚草叶面。

上述的冬孢子粗粉储藏条件为-20度。

本发明的积极效果是：操作简便，成本低，无残留，无污染，也不会侵染其他作物，具有环境安全性。

具体实施方式

7月份于野外采集带有锈菌冬孢子的三裂叶豚草叶片，阴干备用。

将三裂叶豚草种子利用浓度为98%的浓硫酸浸泡处理50s-60s，可以破坏三裂叶豚草种子种皮，利用质量比0.5%的赤霉素浸泡处理72h；于日光温室中播种，土壤湿度85%以上，温度20℃-25℃，覆土3-5cm；待三裂叶豚长到4～6对叶，备用。

配制冬孢子悬浮液：将带有冬孢子的干燥三裂叶豚草叶片用小型粉碎机粉碎，过60目筛，获取冬孢子粗粉；将冬孢子粗粉加入水溶液，加入质量比的终浓度0.5%-1%的木糖或乳糖，用显微镜检查使冬孢子浓度10⁵-10⁶个/ml，即为备用的冬孢子悬浮液。

将制备好的冬孢子悬浮液装入小型喷雾器中，摇匀后均匀地喷洒于三裂叶豚草幼苗的叶片上；温室室内温度20～25℃、相对湿度97%。

接种7-15天后，三裂叶豚草叶子发病，取病斑面积超过叶面积50%的叶子，浸入水中，用硬毛刷将冬孢子刷下，配成10⁵个/ml的水溶液，在每500ml的水溶液中加入1-2ml吐温80和1-2ml透明质酸，即为冬孢子悬浮液。

将上述冬孢子悬浮液按体积比例1；250加水，于傍晚用小型喷雾器将溶液喷洒在三裂叶豚草叶面即可。