[发明专利]新型腈水合酶

权利要求书

1.一种腈水合酶突变体，是具有由序列表1的序列号1的氨基酸序列构成的α亚单位及由序列表1的序列号2的氨基酸序列构成的β亚单位的腈水合酶的至少一个以上的氨基酸置换为其它氨基酸而得到的腈水合酶突变体，其中

所述腈水合酶具有形成参与2聚体形成的α亚单位和β亚单位之间的结合界面、或参与2聚体之间结合的界面的区域，

所述腈水合酶突变体包含下述突变，所述突变是选自由位于所述腈水合酶中所述结合界面或形成所述界面的区域中的、所述序列号1的氨基酸序列的第71、148、188及204位的氨基酸及所述序列号2的氨基酸序列的第10、146、150、160、168、171、176、186、217及218位氨基酸构成的组中的任一氨基酸置换为下述(i)～(xv)所示的其它氨基酸而得到的突变，

(i)所述序列号1的氨基酸序列的第71位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为His，

(ii)所述序列号1的氨基酸序列的第148位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Asp，

(iii)所述序列号1的氨基酸序列的第188位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Gly，

(iv)所述序列号1的氨基酸序列的第204位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Arg、Lys、Trp或Thr，

(v)所述序列号2的氨基酸序列的第10位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Asp、Glu、Trp、Gly、Tyr或Cys，

(vi)所述序列号2的氨基酸序列的第146位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Gly，

(vii)所述序列号2的氨基酸序列的第150位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Ser或Asn，

(viii)所述序列号2的氨基酸序列的第160位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Leu、Trp、Met或Cys，

(ix)所述序列号2的氨基酸序列的第168位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Glu，

(x)所述序列号2的氨基酸序列的第171位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Ala，

(xi)所述序列号2的氨基酸序列的第176位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Ala、Met、Cys或Thr，

(xii)所述序列号2的氨基酸序列的第186位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Glu、Asp、Lys、Arg、Asn、Ser或Gly，

(xiii)所述序列号2的氨基酸序列的第217位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Gly、Val、Leu、Met、Cys、Ser、Thr或His，

(xiv)所述序列号2的氨基酸序列的第218位氨基酸置换为其它氨基酸时，置换为Met或Ser。

2.如权利要求1所述的腈水合酶突变体，其特征在于，

当包含所述(ii)及(iv)的突变时，包含所述序列号1的氨基酸序列第148位和第204位的氨基酸分别置换为Asp和Arg的所述α亚单位，或者

当包含所述(viii)及(xii)的突变时，包含所述序列号2的氨基酸序列第160位和第186位的氨基酸分别置换为Trp和Arg的所述β亚单位。

3.如权利要求1所述的腈水合酶突变体，其特征在于，

当包含所述(i)的突变时，所述序列号1的氨基酸序列第71位氨基酸置换为His的所述α亚单位进一步包含在第19位和第126位氨基酸处分别成为Val和Tyr的置换，或者

当包含所述(ii)及(iv)的突变时，所述序列号1的氨基酸序列第148位和第204位氨基酸分别置换为Asp和Arg的所述α亚单位进一步包含在第36位氨基酸处成为Met的置换。

4.如权利要求1所述的腈水合酶突变体，其特征在于，

当包含所述(v)的突变时，所述序列号2的氨基酸序列第10位氨基酸置换为Asp的所述α亚单位进一步包含在第118位和第200位氨基酸处分别成为Val和Glu的置换，或者

当包含所述(vii)及(xii)的突变时，所述序列号2的氨基酸序列第160位和第186位氨基酸分别置换为Trp和Arg的所述β亚单位进一步包含在第127位氨基酸处成为Ser的置换。