[发明专利]一株海洋真菌桔青霉及其在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一株海洋真菌——半知菌纲壳霉目杯霉科桔青霉（Penicillium citrinum） MNP12010101，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。 

（二）背景技术

癌症一直都是人类难以攻克的一个难题，寻找生理活性强的物质成为人类攻克疾病的主要工作之一。海洋微生物代谢产物研究是近年来国际上新兴的研究课题。 

海洋环境苛刻，具有低温、低照、高盐、高压和寡营养等特点，海洋微生物由于栖息于这样的极限环境下, 产生了与陆地生物完全不同的代谢系统和机体防御系统，所以能产生许多结构新颖、活性特异的次级代谢产物，研究发现它们许多成分也具有抗癌，抗菌等药用价值，并且许多特异的化学结构类型是在陆地微生物中难以发现的。 

细胞培养法是筛选抗肿瘤药物比较常用的一种筛选方法，常用的有MTT法等。 

（三）发明内容

本发明目的是提供一株具有抗肿瘤活性的海洋真菌——桔青霉（Penicillium citrinum）MNP12010101，及其在制备抗肿瘤药物中的应用。 

本发明采用的技术方案是： 

一株具有抗肿瘤活性的海洋真菌——桔青霉（Penicillium citrinum） MNP12010101，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号：CCTCC No：M 2012318，保藏日期 2012年8月28日。 

本发明菌株由浙江省东海海域采集的海水中分离和筛选得到。该菌株的菌落特征如下：涂布或划线接种于平板培养基上生长迅速，28℃培养36 h后长出圆形、外白内绿、直径约0.1~0.3cm的菌落；该菌株的菌体生长特征如下：在液体培养基中，28℃培养36 h后菌体呈颗粒状生长。 

菌株的筛选纯化方法为：将采集的海水运用稀释涂布法涂于土豆平板培养基上，28℃培养至菌落数量不再增加，挑取单菌落至斜面培养基上。28℃培养2d，以菌株形态特征区别进行挑选，即得该菌株，并对该菌株进行菌种鉴定。 

所述的平板培养基和斜面培养基的组成相同，组成为：土豆150~350g/L，葡萄糖10~30g/L，琼脂15~35g/L，溶剂为人工海水，pH7.2~8.0。 

本发明经筛选获得的桔青霉（Penicillium citrinum ）MNP12010101，涂布或划线接种在平板培养基上生长迅速，28℃培养48 h后长出圆形、外白内绿、直径约0.1~0.3 cm的菌落。 

将所述的桔青霉（Penicillium citrinum ）MNP12010101的16sRNA部分核苷酸序列与美国国立生物信息中心（National Center for Biotechnology Information USA，NCBI）的基因库中的微生物16sRNA序列比对，所述桔青霉MNP12010101的18s rRNA的部分核苷酸序列如下： 

GCCGTAGCTGAACCTGCGGAAGGATCATTACCGAGTGCGGGCCCCTCGGGGCCCAACCTCCCACCCGTGTTGCCCGAACCTATGTTGCCTCGGCGGGCCCCGCGCCCGCCGACGGCCCCCCTGAACGCTGTCTGAAGTTGCAGTCTGAGACCTATAACGAAATTAGTTAAAACTTTCAACAACG GATCTCTTGGTTCCGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAACTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCACATTGCGCCCTCTGGTATTCCGGAGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTGCTGCCCTCAAGCCCGGCTTGTGTGTTGGGCCCCGTCCCCCCCGCCGGGGGGACGGGCCCGAAAGGCAGCGGCGGCACCGCGTCCGGTCCTCGAGCGTATGGGGCTTCGTCACCCGCTCTAGTAGGCCCGGCCGGCGCCAGCCGACCCCCAACCTTTAATTATCTCAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCCGGAGGAA。 

本发明还涉及所述的桔青霉MNP12010101在制备抗肿瘤药物中的应用。 

优选的，所述抗肿瘤药物为治疗神经癌、肝癌或淋巴瘤的药物。 

具体的，所述桔青霉MNP12010101的提取物用于制备抗肿瘤药物。