[发明专利]含有结合雌激素的提取物及其提取纯化方法有效
| 申请号： | 201210562681.1 | 申请日： | 2012-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN103040866A | 公开（公告）日： | 2013-04-17 |
| 发明（设计）人： | 孟彩云;秦玉峰;尤金花;周祥山 | 申请（专利权）人： | 山东东阿阿胶股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K35/22 | 分类号： | A61K35/22;A61K31/566;A61K31/565;A61P5/30;B01D15/10 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;丁金玲 |
| 地址： | 252299 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 含有 结合 雌激素 提取物 及其 提取 纯化 方法 | ||
1.一种从孕驴尿中提取纯化结合雌激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将采集的孕驴尿样品经过大孔树脂吸附柱分离，采用水混溶性溶剂进行梯度洗脱，得到含有结合态雌激素的浓缩液；
（2）将提取的结合态雌激素浓缩液，经反相C18柱富集纯化，进行上样、水混溶性溶剂梯度洗脱、收集组分浓缩，得到纯化的结合态雌激素混合物；
（3）将纯化的结合态雌激素混合物，加水和醋酸缓冲液，震荡，然后加酶进行酶解，乙酸乙酯萃取，得到游离雌激素混合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）所用的大孔吸附树脂为苯乙烯型非极性共聚体D101大孔吸附树脂。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）所用纯化方法为反相C18柱分离纯化，且上样前，C18反相柱经洗脱溶剂预先平衡。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）醋酸缓冲液浓度为0.2M，pH=5.2。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中所用酶为硫酸酯酶。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述水混溶性洗脱溶剂选自低级链烷醇。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述洗脱溶剂为甲醇或乙醇。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（1）中的孕驴尿为孕期在3个月到10个月之间的孕驴尿液。
9.权利要求1-8任一项所述的方法得到的含有结合雌激素的提取物。
10.根据权利要求9所述的提取物，其特征在于：所述的提取物混合物中三种主要结合态雌激素为雌酮硫酸钠、马烯雌酮硫酸钠、17α-雌二醇硫酸钠。
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