[发明专利]肿瘤细胞识别探针、检测方法及应用

权利要求书

1.一种肿瘤细胞识别探针，长度大于等于70bp，包括与肿瘤细胞特异性结合的核酸适体及位于所述核酸适体5’端或3’端的延长序列，所述延长序列为一段自身不会形成二级结构的单链核苷酸序列。

2.权利要求1所述的识别探针，其特征在于，所述识别探针长度为80-100bp。

3.权利要求1所述的识别探针，其特征在于，所述核酸适体为肺癌A549细胞核酸适体S11e。

4.权利要求3所述的识别探针，其特征在于，具有序列表中SEQ ID No.2或SEQ ID No.5所述核苷酸序列。

5.一种肿瘤细胞检测方法，包括：

将权利要求1所述识别探针与待测肿瘤细胞混合孵育，除去未与肿瘤细胞结合的游离识别探针，再进行细胞裂解，提取裂解液；

以所述识别探针延长序列为模版对裂解液进行实时荧光定量PCR，得到达到荧光强度阈值时的特征扩增循环数；

产生表示识别探针初始浓度与达到荧光强度阈值时的特征扩增循环数之间的相关性的函数；

利用所述函数计算裂解液中识别探针初始浓度，即与肿瘤细胞结合的识别探针的浓度。

6.一种肿瘤细胞定量测定方法，包括：

将已知浓度的肿瘤细胞稀释成不同的浓度作为标准细胞样品；

用权利要求5所述的检测方法检测标准细胞样品结合识别探针的浓度；

产生表示肿瘤细胞浓度和与肿瘤细胞结合的识别探针浓度之间的相关性函数；

用权利要求5所述的检测方法对待测样品进行检测；

利用所述函数计算待测样品的肿瘤细胞浓度。

7.用于检测肿瘤细胞的试剂盒，包含：

权利要求1所述肿瘤细胞识别探针；和

用于检测与肿瘤细胞结合的识别探针的数量的试剂。

8.权利要求7所述的试剂盒，还包括阳性对照肿瘤细胞。

9.权利要求7或8所述的试剂盒，其中所述试剂含有用于扩增识别探针的引物。

10.权利要求9所述的试剂盒，所述引物包括序列为SEQ ID No.3和SEQ ID No.4的寡核苷酸或序列为SEQ ID No.6和SEQ ID No.7的寡核苷酸。