[发明专利]一种从橘红中提取柚皮苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从化橘红中提取柚皮苷的方法，尤其是提取高纯度柚皮苷的方法。发明所称的高纯度柚皮苷是指纯度在98%以上的柚皮苷。

背景技术

柚皮苷是一种天然产物，广泛存在于芸香科植物中，尤以未成熟的果皮含量最高。它具有止咳、化痰、抗炎、抗肿瘤、抗衰老、降胆固醇、改善血管循环等生物活性。

获得柚皮苷的方法分为两种：一种是化学合成法，但此种方法合成路线复杂，成本高；第二种方法，也是用得最广泛的方法，即从芸香科植物中提取。目前已报道的有，将含有柚皮苷的药材经水提、通过大孔树脂、浓缩并收集沉淀后用水或乙醇重结晶后得到（苏薇薇等，CN03113604.4和CN03146997.3）；将化橘红粗粉经水提、调节pH、通过大孔树脂、浓缩并收集沉淀后用无水乙醇重结晶后得到（王琳等，CN200910232802.4）；将枳壳生药用60%乙醇提取后，通过大孔树脂，最后用高速逆流色谱纯化后得到（范国荣等，CN200410053284.7）；将粉碎好的柚子粉经高压萃取釜萃取，萃取液浓缩后除去不溶物，调节pH后析晶，再用无水乙醇重结晶后得到（许晨等，CN200910229939.4）；贾冬英等报道了使用70%乙醇在60℃下提取后，用蒸馏水重结晶可得到纯度在90%的柚皮苷（贾冬英，姚开，谭敏，张铭让. 柚皮中柚皮苷的乙醇提取工艺研究[J]. 中草药，2002，33（9）：801）；韦敏等报道了用95%乙醇的提取化橘红，提取液经大孔树脂纯化后冷冻干燥，可得纯度达85%的柚皮苷（韦敏，杨中林，吴建民. 大孔吸附树脂法分离纯化化橘红中柚皮苷的研究[J]. 中成药，2007，29（3）：352）。

尽管方法众多，但这些方法都不尽完善。在从药材中提取出粗品的柚皮苷时，许多方法都有加入CaCl₂或调节pH，而且几乎都使用了大孔树脂来进行初步纯化，这些操作复杂，在洗脱时会用到一些有毒溶剂，污染环境，且加入的物质若不去除干净，可能会伤害人体，不利于工业化大生产。且所得的柚皮苷纯度不够理想，入药使用时容易产生毒副作用。虽然过高速逆流色谱和高压萃取釜能够获得纯度较高的柚皮苷，但对设备的要求较高，成本相对也较高，不利于工业化生产。

发明内容

为了克服以上问题，寻求一种简单易行的柚皮苷的提取纯化方法，发明人对柚皮苷的提取纯化工艺进行了深入的研究，得到了操作简单、产量高的柚皮苷提取纯化工艺。

本发明的目的在于提供一种从化橘红中提取纯化柚皮苷的方法。该方法包括以下步骤：

（1）水提：将化橘红用水加热提取1～4次，每次用水的体积为化橘红质量的8～16倍，时间为0.5～4小时；过滤，合并水提滤液；

（2）醇沉：将上述水提滤液浓缩至其密度为1.10～1.30克/毫升；加乙醇，至醇浓度为40%～80%；放置6～48小时，过滤，收集醇沉滤液；

（3）回收乙醇：将醇沉滤液回收乙醇至无醇味，放置4～15天，过滤，干燥得柚皮苷粗品；

（4）重结晶：将柚皮苷粗品用20%～50%的乙醇水溶液进行两次重结晶干燥后得柚皮苷纯品；每次重结晶的乙醇水溶液的体积均为固体质量的4～10倍，析晶温度为5～25℃；其中，第一次重结晶析晶时间为24～36小时，得第一次重结晶粗产品；第二次重结晶采用两步析晶法，第一步析晶时间为6～8小时，第二步析晶时间为24～36小时。

第（4）步骤中第二次重结晶采用两步析晶法的目的是先滤除杂质野漆树苷，再将母液析晶析出柚皮苷，从而保证得到高纯度的柚皮苷。

所述步骤（4）中，第二次重结晶采用的两步析晶法具体为：取第一次重结晶粗产品加入所述乙醇水溶液，加热搅拌至全溶，趁热过滤，收集滤液，滤液冷却至15～25℃，放置6～8小时，抽滤，弃去滤渣，所得滤液继续放置24～36小时，抽滤，固体用水洗涤二次，每次用水量为固体质量的1～4倍，抽干，收集固体并干燥后得柚皮苷纯品。

上述工艺过程中所涉及的工艺参数范围，均为采用正交设计或均匀设计进行实验研究后所确定。在上述工艺所指定工艺参数范围进行提取分离，均可以得到纯度在98.0%以上的柚皮苷，上述工艺参数在所述范围内的改变仅对柚皮苷的得率有影响。

在中试规模的多次实验中，采用本发明所述的提取纯化方法得到的柚皮苷纯品，经外标法测定产品纯度均在98.0%以上，为高纯度柚皮苷。实验表明本工艺切实可行，有操作简单、溶剂低毒、对环境无污染、产品纯度高、重现性好等特点。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步说明，但不以任何方式限制本发明。